Przejdź do treści
MeWo
Chusteczka
Skóra
Choroba
Czerniak skóry
Miejsce przerzutów
Węzeł chłonny
Synonimy
MEWO, Mewo, Me Wo, Me-Wo, Mevo, SK-MEL-MeWo, Mel-MeWo, BI-Mel, EST50

Dokumenty

MeWo

Cell line · Numer produktu 300285

The MeWo cell line is a fibroblast-like melanoma cell line isolated from the skin of a 78-year-old White male patient with malignant melanoma. These cells...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa MeWo to fibroblastopodobna linia komórkowa czerniaka wyizolowana ze skóry 78-letniego białego pacjenta z czerniakiem złośliwym. Komórki te wykazują charakterystyczną morfologię, która odzwierciedla ich fibroblastyczne pochodzenie. Komórki MeWo są cenne w badaniach nad rakiem, w szczególności do badania właściwości biologicznych czerniaka i interakcji immunologicznych. Podobnie jak w przypadku innych linii komórkowych czerniaka, komórki MeWo odegrały kluczową rolę w badaniu antygenów nowotworowych i ich immunogenności. W różnych badaniach wykorzystano komórki MeWo do identyfikacji specyficznych antygenów powierzchniowych, które mają kluczowe znaczenie dla zrozumienia interakcji komórek czerniaka z układem odpornościowym.

Jedną z godnych uwagi właściwości komórek MeWo jest ich zdolność do wspierania wzrostu izolatów wirusa ospy wietrznej i półpaśca (VZV), z optymalnymi warunkami wzrostu w temperaturze 32°C, chociaż mogą one nadal podtrzymywać wzrost VZV w temperaturze 36°C. Sprawia to, że linia komórkowa MeWo jest szczególnie przydatna w badaniach wirusologicznych, zwłaszcza w kontekście replikacji wirusa i badań patogenezy w różnych warunkach temperaturowych. Dodatkowo, komórki MeWo są nowotworowe, ponieważ mogą tworzyć guzy po wstrzyknięciu nagim myszom, co podkreśla ich użyteczność w badaniach nad nowotworowością in vivo. Ta cecha, w połączeniu z ich wrażliwością na infekcję wirusową, podkreśla, że komórki MeWo są wszechstronnym modelem zarówno do badań nad rakiem, jak i chorobami zakaźnymi.

W badaniach z udziałem linii komórkowej MeWo zbadano również ekspresję antygenów związanych z czerniakiem, gdzie MeWo wykorzystano jako referencyjną linię komórkową w testach absorpcji w celu identyfikacji unikalnych i wspólnych antygenów w różnych próbkach czerniaka. Profil antygenowy komórek MeWo, zidentyfikowany w tych badaniach, obejmuje antygeny, które są wspólne z innymi liniami komórkowymi czerniaka, a także te, które mogą być unikalne dla tej linii komórkowej, przyczyniając się do szerszego zrozumienia immunologii czerniaka.

Chusteczka
Skóra
Choroba
Czerniak skóry
Miejsce przerzutów
Węzeł chłonny
Zastosowania
Badania nad wirusami
Synonimy
  • MEWO
  • Mewo
  • Me Wo
  • Me-Wo
  • Mevo
  • SK-MEL-MeWo
  • Mel-MeWo
  • BI-Mel
  • EST50

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do fibroblastów
Nowotworotwórczy
Tworzy czerniaka złośliwego
Stan MSI
Stabilny (MSS)

04Identyfikatory

Źródło
MeWo (numer katalogowy Cytion 300285)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0445

05Ekspresja i podatność

Profil mutacji
BRAF V600E wt
Produkty
Melanina

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (numer artykułu Cytion 820100a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS i 1% NEAA
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
78 lat
Pochodzenie etniczne
Kaukaski