Pāriet uz saturu
MeWo
Audums
Āda
Slimība
Ādas melanoma
Metastāžu vieta
Limfmezgls
Sinonīmi
MEWO, Mewo, Me Wo, Me-Wo, Mevo, SK-MEL-MeWo, Mel-MeWo, BI-Mel, EST50

Dokumenti

MeWo

Cell line · Preces numurs 300285

The MeWo cell line is a fibroblast-like melanoma cell line isolated from the skin of a 78-year-old White male patient with malignant melanoma. These cells...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

MeWo šūnu līnija ir fibroblastiem līdzīga melanomas šūnu līnija, kas izolēta no 78 gadus veca baltādaina vīrieša ādas, kuram bija ļaundabīga melanoma. Šīm šūnām ir raksturīga morfoloģija, kas atspoguļo to fibroblastisko izcelsmi. MeWo šūnas ir vērtīgas vēža pētījumos, jo īpaši melanomas bioloģisko īpašību un imūnsistēmas mijiedarbības izpētē. Tāpat kā citas melanomas šūnu līnijas, arī MeWo šūnas ir bijušas noderīgas audzēja antigēnu un to imunogenitātes izpētē. Dažādos pētījumos MeWo šūnas ir izmantotas, lai noteiktu specifiskus virsmas antigēnus, kas ir būtiski, lai izprastu, kā melanomas šūnas mijiedarbojas ar imūnsistēmu.

Viena no MeWo šūnu ievērojamām īpašībām ir to spēja atbalstīt varicella-zoster vīrusa (VZV) izolātu augšanu, optimālos augšanas apstākļos 32 °C temperatūrā, lai gan tās var uzturēt VZV augšanu arī 36 °C temperatūrā. Tas padara MeWo šūnu līniju īpaši noderīgu virusoloģiskajos pētījumos, jo īpaši saistībā ar vīrusu replikācijas un patoģenēzes pētījumiem mainīgas temperatūras apstākļos. Turklāt MeWo šūnas ir tumorogēnas, jo tās var veidot audzējus, injicējot nude pelēm, un šī īpašība uzsver to lietderību in vivo tumorogēniskuma pētījumos. Šī īpašība kopā ar MeWo šūnu reaktivitāti pret vīrusu infekciju liecina, ka tās ir universāls modelis gan vēža, gan infekcijas slimību pētījumiem.

Pētījumos, kuros izmantota MeWo šūnu līnija, ir pētīta arī ar melanomu saistīto antigēnu ekspresija, kur MeWo tika izmantota kā references šūnu līnija absorbcijas testos, lai noteiktu unikālus un kopīgus antigēnus dažādos melanomas paraugos. MeWo šūnu antigēnu profils, kas identificēts šajos pētījumos, ietver antigēnus, kas ir kopīgi ar citām melanomas šūnu līnijām, kā arī tos, kas var būt unikāli šai šūnu līnijai, veicinot plašāku izpratni par melanomas imunoloģiju.

Audums
Āda
Slimība
Ādas melanoma
Metastāžu vieta
Limfmezgls
Pieteikumi
Vīrusu pētījumi
Sinonīmi
  • MEWO
  • Mewo
  • Me Wo
  • Me-Wo
  • Mevo
  • SK-MEL-MeWo
  • Mel-MeWo
  • BI-Mel
  • EST50

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Fibroblastiem līdzīgs
Tumorogēns
Veido ļaundabīgu melanomu
MSI statuss
Stabils (MSS)

04Identifikatori

Atsauce
MeWo (Cytion kataloga numurs 300285)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_0445

05Pazīmes un uzņēmība

Mutāciju profils
BRAF V600E wt
Produkti
Melanīns

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamīns, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion izstrādājuma numurs 820100a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS un 1% NEAA
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
78 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis