Mine otse sisu juurde
MeWo
Kude
Nahk
Haigus
Nahamelanoom
Metastaaside asukoht
Lümfisõlm
Sünonüümid
MEWO, Mewo, Me Wo, Me-Wo, Mevo, SK-MEL-MeWo, Mel-MeWo, BI-Mel, EST50

Dokumendid

MeWo

Cell line · Toote number 300285

The MeWo cell line is a fibroblast-like melanoma cell line isolated from the skin of a 78-year-old White male patient with malignant melanoma. These cells...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

MeWo rakuliin on fibroblastilaadne melanoomi rakuliin, mis on isoleeritud 78-aastase valge meespatsiendi nahast, kellel on pahaloomuline melanoom. Nendel rakkudel on iseloomulik morfoloogia, mis peegeldab nende fibroblastilist päritolu. MeWo rakud on väärtuslikud vähiuuringutes, eelkõige melanoomi bioloogiliste omaduste ja immuunsüsteemi koostoimete uurimiseks. Nagu ka teised melanoomi rakuliinid, on MeWo rakud olnud olulised kasvaja antigeenide ja nende immunogeensuse uurimisel. Erinevates uuringutes on kasutatud MeWo rakke, et tuvastada spetsiifilisi pindmiseid antigeene, mis on olulised melanoomirakkude ja immuunsüsteemi vastastikuse mõju mõistmisel.

MeWo rakkude üks märkimisväärseid omadusi on nende võime toetada varicella-zoster viiruse (VZV) isolaatide kasvu, kusjuures optimaalsed kasvutingimused on 32 °C juures, kuigi nad võivad VZV kasvu säilitada ka 36 °C juures. See muudab MeWo rakuliini eriti kasulikuks viroloogilistes uuringutes, eriti seoses viiruse replikatsiooni ja patogeneesi uuringutega erinevates temperatuuritingimustes. Lisaks sellele on MeWo rakud tumorigeensed, sest nad võivad nude hiirtele süstimisel moodustada kasvajaid, mis rõhutab nende kasulikkust in vivo kasvajavõime uuringutes. See omadus koos nende tundlikkusega viirusnakkuse suhtes rõhutab MeWo rakke kui mitmekülgset mudelit nii vähi- kui ka nakkushaiguste uurimisel.

MeWo rakuliiniga tehtud uuringutes on uuritud ka melanoomiga seotud antigeenide ekspressiooni, kus MeWo on kasutatud võrdlusrakuliinina absorbeerimisanalüüsides, et tuvastada unikaalseid ja ühiseid antigeene erinevates melanoomiproovides. MeWo rakkude antigeeniprofiil, nagu on kindlaks tehtud nendes uuringutes, sisaldab antigeene, mis on ühised teiste melanoomi rakuliinidega, samuti neid, mis võivad olla ainulaadsed ainult sellele rakuliinile, aidates kaasa melanoomi immunoloogia laiemale mõistmisele.

Kude
Nahk
Haigus
Nahamelanoom
Metastaaside asukoht
Lümfisõlm
Rakendused
Viirusuuringud
Sünonüümid
  • MEWO
  • Mewo
  • Me Wo
  • Me-Wo
  • Mevo
  • SK-MEL-MeWo
  • Mel-MeWo
  • BI-Mel
  • EST50

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Fibroblastilaadsed
Tuumorigeenne
Moodustab pahaloomulise melanoomi
MSI staatus
Stabiilne (MSS)

04Tunnused

Viide
MeWo (Cytioni katalooginumber 300285)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0445

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Mutatsiooniprofiil
BRAF V600E wt
Tooted
Melaniin

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytioni artikli number 820100a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS ja 1% NEAAga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
78 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia