Przejdź do treści
NCI-H157
Chusteczka
Płuco
Choroba
Rak płaskonabłonkowy płuc
Synonimy
NCI H157, H157, H-157, NCI-157

Dokumenty

NCI-H157

Cell line · Numer produktu 300387

NCI-H157 is a human non-small cell lung carcinoma (NSCLC) cell line, primarily used in cancer research to study tumorigenesis, chemotherapy resistance, an...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

NCI-H157 to ludzka linia komórkowa niedrobnokomórkowego raka płuca (NSCLC), wykorzystywana głównie w badaniach nad rakiem do badania nowotworzenia, oporności na chemioterapię i szlaków molekularnych zaangażowanych w progresję raka płuc. Komórki NCI-H157 są szczególnie przydatne do badania roli czynnika indukowanego hipoksją-1 alfa (HIF-1α) w NSCLC. Badania wykazały, że HIF-1α odgrywa kluczową rolę w promowaniu angiogenezy, proliferacji i przeżycia komórek nowotworowych w warunkach niedotlenienia. Obniżenie poziomu HIF-1α poprzez siRNA w komórkach NCI-H157 znacząco zmniejsza proliferację komórek, indukuje apoptozę i upośledza zdolność inwazyjną komórek nowotworowych.

Co więcej, leczenie skojarzone przy użyciu siRNA HIF-1α i środków chemioterapeutycznych, takich jak cisplatyna (DDP), wzmacnia działanie cytotoksyczne na komórki NCI-H157. Wykazano, że zmniejszenie ekspresji HIF-1α zwiększa aktywność białek apoptotycznych, takich jak kaspazy 3 i 9, jednocześnie zmniejszając poziom białek antyapoptotycznych, takich jak Bcl-2. Dodatkowo, nokaut HIF-1α hamuje kluczowe szlaki sygnałowe zaangażowane we wzrost guza, w tym szlaki PI3K/AKT i Raf/MEK/ERK. Te zmiany molekularne przyczyniają się do tłumienia przeżywalności i inwazyjności komórek nowotworowych.

Linia komórkowa NCI-H157 reaguje również na różne naturalne związki i ekstrakty roślinne. Na przykład stwierdzono, że ekstrakty z *Stellera chamaejasme* L. indukują apoptozę w komórkach NCI-H157 poprzez szlak receptora śmierci Fas, co dodatkowo podkreśla użyteczność linii komórkowej w ocenie nowych środków terapeutycznych w raku płuc.

Chusteczka
Płuco
Choroba
Rak płaskonabłonkowy płuc
Synonimy
  • NCI H157
  • H157
  • H-157
  • NCI-157

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Identyfikatory

Źródło
NCI-H157 (numer katalogowy Cytion 300387)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0463

04Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

06Darczyńca

Wiek dawcy
59 lat