Siirry sisältöön
NCI-H157
Kudos
Keuhkot
Sairaus
Keuhkojen okasolusyöpä
Synonyymit
NCI H157, H157, H-157, NCI-157

Asiakirjat

NCI-H157

Cell line · Tuotenumero 300387

NCI-H157 is a human non-small cell lung carcinoma (NSCLC) cell line, primarily used in cancer research to study tumorigenesis, chemotherapy resistance, an...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

NCI-H157 on ihmisen ei-pienisoluinen keuhkosyöpä (NSCLC), jota käytetään ensisijaisesti syöpätutkimuksessa kasvainten synnyn, kemoterapiaresistenssin ja keuhkosyövän etenemiseen liittyvien molekyylireittien tutkimiseen. NCI-H157-solut ovat erityisen käyttökelpoisia tutkittaessa hypoksiaa indusoivan tekijä-1-alfan (HIF-1α) roolia NSCLC:ssä. Tutkimukset ovat osoittaneet, että HIF-1α:lla on ratkaiseva rooli syöpäsolujen angiogeneesin, proliferaation ja selviytymisen edistämisessä hypoksisissa olosuhteissa. HIF-1α:n alaregulaatio siRNA:n avulla NCI-H157-soluissa vähentää merkittävästi solujen lisääntymistä, indusoi apoptoosia ja heikentää kasvainsolujen invasiivista kykyä.

Lisäksi yhdistelmähoidot, joissa käytetään HIF-1α-siRNA:ta ja kemoterapia-aineita, kuten sisplatiinia (DDP), tehostavat sytotoksisia vaikutuksia NCI-H157-soluihin. HIF-1α:n ilmentymisen vähentämisen on osoitettu lisäävän apoptoottisten proteiinien, kuten kaspaasien 3 ja 9, aktiivisuutta ja vähentävän samalla anti-apoptoottisten proteiinien, kuten Bcl-2:n, tasoja. Lisäksi HIF-1α:n tyrmäys estää keskeisiä kasvainten kasvuun liittyviä signaalireittejä, kuten PI3K/AKT- ja Raf/MEK/ERK-reittejä. Nämä molekyylimuutokset vaikuttavat osaltaan kasvainsolujen eloonjäämisen ja invasiivisuuden estämiseen.

NCI-H157-solulinja reagoi myös erilaisiin luonnollisiin yhdisteisiin ja kasviuutteisiin. Esimerkiksi *Stellera chamaejasme* L. -kasviuutteiden on havaittu indusoivan apoptoosia NCI-H157-soluissa Fas-kuolemareseptorireitin kautta, mikä korostaa entisestään solulinjan käyttökelpoisuutta keuhkosyövän uusien terapeuttisten aineiden arvioinnissa.

Kudos
Keuhkot
Sairaus
Keuhkojen okasolusyöpä
Synonyymit
  • NCI H157
  • H157
  • H-157
  • NCI-157

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Tunnisteet

Lähdeviite
NCI-H157 (Cytionin luettelonumero 300387)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_0463

04Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

06Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
59 vuotta