Pāriet uz saturu
NCI-H157
Audums
Plaušas
Slimība
Plaušu plakanšūnu karcinoma
Sinonīmi
NCI H157, H157, H-157, NCI-157

Dokumenti

NCI-H157

Cell line · Preces numurs 300387

NCI-H157 is a human non-small cell lung carcinoma (NSCLC) cell line, primarily used in cancer research to study tumorigenesis, chemotherapy resistance, an...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

NCI-H157 ir cilvēka nesmalto šūnu plaušu karcinomas (NSCLC) šūnu līnija, ko galvenokārt izmanto vēža pētījumos, lai pētītu audzēju rašanos, rezistenci pret ķīmijterapiju un molekulāros ceļus, kas saistīti ar plaušu vēža progresēšanu. NCI-H157 šūnas ir īpaši noderīgas, lai pētītu hipoksiju inducējošā faktora-1 alfa (HIF-1α) lomu NSCLC. Pētījumi liecina, ka HIF-1α ir izšķiroša nozīme vēža šūnu angioģenēzes, proliferācijas un izdzīvošanas veicināšanā hipoksiskos apstākļos. HIF-1α samazināšana ar siRNA palīdzību NCI-H157 šūnās ievērojami samazina šūnu proliferāciju, izraisa apoptozi un mazina audzēja šūnu invazīvo spēju.

Turklāt kombinēta ārstēšana, izmantojot HIF-1α siRNA un ķīmijterapijas līdzekļus, piemēram, cisplatīnu (DDP), pastiprina citotoksisko iedarbību uz NCI-H157 šūnām. Ir pierādīts, ka HIF-1α ekspresijas samazināšana palielina apoptozes olbaltumvielu, piemēram, kaspāžu 3 un 9, aktivitāti, vienlaikus samazinot antiapoptozes olbaltumvielu, piemēram, Bcl-2, līmeni. Turklāt HIF-1α nomākšana kavē galvenos signālu ceļus, kas saistīti ar audzēja augšanu, tostarp PI3K/AKT un Raf/MEK/ERK ceļus. Šīs molekulārās izmaiņas veicina audzēja šūnu izdzīvošanas un invazivitātes nomākšanu.

NCI-H157 šūnu līnija reaģē arī uz dažādiem dabīgiem savienojumiem un augu ekstraktiem. Piemēram, ir konstatēts, ka *Stellera chamaejasme* L. ekstrakti izraisa apoptozi NCI-H157 šūnās, izmantojot Fas nāves receptoru ceļu, kas vēl vairāk uzsver šūnu līnijas lietderību jaunu plaušu vēža ārstēšanas līdzekļu novērtēšanā.

Audums
Plaušas
Slimība
Plaušu plakanšūnu karcinoma
Sinonīmi
  • NCI H157
  • H157
  • H-157
  • NCI-157

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Identifikatori

Atsauce
NCI-H157 (Cytion kataloga numurs 300387)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_0463

04Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

06Ziedotājs

Donora vecums
59 gadi