Mine otse sisu juurde
NCI-H157
Kude
Kopsud
Haigus
Kopsu lamerakk-kartsinoom
Sünonüümid
NCI H157, H157, H-157, NCI-157

Dokumendid

NCI-H157

Cell line · Toote number 300387

NCI-H157 is a human non-small cell lung carcinoma (NSCLC) cell line, primarily used in cancer research to study tumorigenesis, chemotherapy resistance, an...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

NCI-H157 on inimese mitteväikerakk-kopsukartsinoomi (NSCLC) rakuliin, mida kasutatakse peamiselt vähiuuringutes, et uurida kasvajate teket, kemoteraapia resistentsust ja kopsuvähi progresseerumisega seotud molekulaarseid radu. NCI-H157 rakud on eriti kasulikud hüpoksia indutseeritava faktor-1 alfa (HIF-1α) rolli uurimiseks NSCLC-s. Uuringud on näidanud, et HIF-1α mängib olulist rolli vähirakkude angiogeneesi, proliferatsiooni ja ellujäämise edendamisel hüpoksilistes tingimustes. HIF-1α alareguleerimine siRNA abil NCI-H157 rakkudes vähendab märkimisväärselt rakkude proliferatsiooni, kutsub esile apoptoosi ja kahjustab kasvajarakkude invasiivset võimet.

Lisaks sellele suurendab HIF-1α siRNA ja kemoteraapiaainete, näiteks tsisplatiini (DDP) kombineeritud ravi tsütotoksilist mõju NCI-H157 rakkudele. On näidatud, et HIF-1α ekspressiooni vähendamine suurendab apoptootiliste valkude, nagu kaspaasid 3 ja 9, aktiivsust, vähendades samal ajal antiapoptootiliste valkude, nagu Bcl-2, taset. Lisaks sellele pärsib HIF-1α vähendamine tuumori kasvuga seotud peamisi signaaliradu, sealhulgas PI3K/AKT ja Raf/MEK/ERK radasid. Need molekulaarsed muutused aitavad kaasa kasvajarakkude ellujäämise ja invasiivsuse pärssimisele.

NCI-H157 rakuliin reageerib ka erinevatele looduslikele ühenditele ja taimeekstraktidele. Näiteks on leitud, et *Stellera chamaejasme* L. ekstraktid indutseerivad NCI-H157 rakkudes apoptoosi Fas surmaretseptori raja kaudu, mis rõhutab veelgi selle rakuliini kasulikkust kopsuvähi uute ravimeetodite hindamisel.

Kude
Kopsud
Haigus
Kopsu lamerakk-kartsinoom
Sünonüümid
  • NCI H157
  • H157
  • H-157
  • NCI-157

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Tunnused

Viide
NCI-H157 (Cytioni katalooginumber 300387)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0463

04Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

06Annetaja

Doonori vanus
59 aastat