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NCI-H157
Gewebe
Lunge
Krankheit
Plattenepithelkarzinom der Lunge
Synonyme
NCI H157, H157, H-157, NCI-157

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NCI-H157

Cell line · Artikelnummer 300387

NCI-H157 is a human non-small cell lung carcinoma (NSCLC) cell line, primarily used in cancer research to study tumorigenesis, chemotherapy resistance, an...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

NCI-H157 ist eine menschliche Zelllinie des nicht-kleinzelligen Lungenkarzinoms (NSCLC), die in erster Linie in der Krebsforschung zur Untersuchung der Tumorentstehung, der Chemotherapieresistenz und der molekularen Signalwege, die am Fortschreiten von Lungenkrebs beteiligt sind, verwendet wird. NCI-H157-Zellen eignen sich besonders für die Untersuchung der Rolle des Hypoxie-induzierbaren Faktors-1 alpha (HIF-1α) bei NSCLC. Studien haben gezeigt, dass HIF-1α eine entscheidende Rolle bei der Förderung der Angiogenese, der Proliferation und des Überlebens von Krebszellen unter hypoxischen Bedingungen spielt. Die Herunterregulierung von HIF-1α mittels siRNA in NCI-H157-Zellen reduziert die Zellproliferation signifikant, induziert Apoptose und beeinträchtigt die Invasionsfähigkeit der Tumorzellen.

Darüber hinaus verstärken Kombinationsbehandlungen aus HIF-1α siRNA und Chemotherapeutika wie Cisplatin (DDP) die zytotoxische Wirkung auf NCI-H157-Zellen. Es hat sich gezeigt, dass die Verringerung der HIF-1α-Expression die Aktivität von apoptotischen Proteinen wie den Caspasen 3 und 9 erhöht, während der Gehalt an anti-apoptotischen Proteinen wie Bcl-2 sinkt. Darüber hinaus hemmt der Knockdown von HIF-1α wichtige Signalwege, die am Tumorwachstum beteiligt sind, darunter die PI3K/AKT- und Raf/MEK/ERK-Wege. Diese molekularen Veränderungen tragen zur Unterdrückung des Überlebens und der Invasivität von Tumorzellen bei.

Die NCI-H157-Zelllinie spricht auch auf verschiedene Naturstoffe und Pflanzenextrakte an. So wurde beispielsweise festgestellt, dass Extrakte aus *Stellera chamaejasme* L. in NCI-H157-Zellen über den Fas-Todesrezeptorweg Apoptose auslösen, was die Nützlichkeit der Zelllinie bei der Evaluierung neuartiger therapeutischer Wirkstoffe für Lungenkrebs weiter unterstreicht.

Gewebe
Lunge
Krankheit
Plattenepithelkarzinom der Lunge
Synonyme
  • NCI H157
  • H157
  • H-157
  • NCI-157

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Bezeichner

Quellenangabe
NCI-H157 (Cytion-Katalognummer 300387)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_0463

04Handhabung und Kultur

Nährmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

06Spender

Alter des Spenders
59 Jahre