NCI-H211

NCI-H211 to ludzka linia komórkowa raka płuca sklasyfikowana jako niedrobnokomórkowy rak płuca (NSCLC). Pochodzi od dorosłego pacjenta i stanowi część panelu modeli nowotworów złośliwych klatki piersiowej opracowanych przez Oddział Onkologii Medycznej NCI-Navy. Linia komórkowa wykazuje morfologię nabłonkową i przylegające zachowanie wzrostowe in vitro, dzięki czemu nadaje się do systemów hodowli jednowarstwowej. Zazwyczaj jest utrzymywana w pożywce RPMI-1640 uzupełnionej 10% surowicą płodową bydlęcą i inkubowana w standardowych warunkach (37°C, 5% CO₂).

Na poziomie molekularnym NCI-H211 zawiera mutacje zgodne z patogenezą NSCLC. W szczególności posiada aktywującą mutację KRAS, charakterystyczną dla podgrupy gruczolakoraków płuca, która stymuluje sygnalizację onkogenną poprzez szlaki MAPK i PI3K/AKT. Mutacja ta przyczynia się do oporności linii komórkowej na niektóre terapie celowane, w szczególności inhibitory EGFR, jednocześnie czyniąc ją użytecznym modelem do badania strategii terapeutycznych ukierunkowanych na KRAS. Badania profilowania na poziomie białek, takie jak te wykorzystujące macierze białkowe z odwróconą fazą (RPPA), zidentyfikowały NCI-H211 wśród modeli raka płuca z mutacją KRAS o specyficznych zależnościach sygnałowych, pomagając w identyfikacji biomarkerów i celów terapeutycznych.

NCI-H211 został wykorzystany w badaniach proteomicznych i farmakologicznych na dużą skalę oraz do oceny wrażliwości na leki i wzorców ekspresji białek. Cechy te sprawiają, że jest to skuteczny model do badań translacyjnych skupionych na opracowywaniu metod leczenia NSCLC wywołanego przez KRAS oraz badaniu mechanizmów oporności związanych ze środkami celowanymi i cytotoksycznymi.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym