NCI-H211

La NCI-H211 es una línea celular de carcinoma pulmonar humano clasificada como cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC). Se obtuvo de un paciente adulto y forma parte del panel de modelos de neoplasias malignas torácicas desarrollado por la Rama de Oncología Médica del NCI y la Marina. La línea celular presenta una morfología epitelial y un comportamiento de crecimiento adherente in vitro, lo que la hace adecuada para sistemas de cultivo en monocapa. Por lo general, se mantiene en medio RPMI-1640 suplementado con un 10 % de suero fetal bovino y se incuba en condiciones estándar (37 °C, 5 % de CO₂).

A nivel molecular, la NCI-H211 presenta mutaciones compatibles con la patogénesis del CPCNP. Específicamente, posee una mutación activadora del gen KRAS, un rasgo característico de un subgrupo de adenocarcinomas de pulmón que impulsa la señalización oncogénica a través de las vías MAPK y PI3K/AKT. Esta mutación contribuye a la resistencia de la línea celular a ciertas terapias dirigidas, particularmente a los inhibidores del EGFR, al tiempo que la convierte en un modelo útil para estudiar estrategias terapéuticas dirigidas contra KRAS. Los estudios de perfilado a nivel proteico, como los que utilizan matrices de proteínas de fase inversa (RPPA), han identificado a la NCI-H211 entre los modelos de cáncer de pulmón con mutación en KRAS que presentan dependencias específicas de señalización, lo que ayuda a identificar biomarcadores y dianas terapéuticas.

La línea NCI-H211 ha sido objeto de cribados proteómicos y farmacológicos a gran escala y se ha utilizado para evaluar la sensibilidad a los fármacos y los patrones de expresión proteica. Estas características la convierten en un modelo eficaz para la investigación traslacional enfocada en el desarrollo de enfoques terapéuticos para el CPNM impulsado por KRAS y en la investigación de los mecanismos de resistencia asociados con agentes dirigidos y citotóxicos.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.