NCI-H211

A NCI-H211 é uma linhagem celular de carcinoma pulmonar humano classificada como câncer de pulmão de células não pequenas (NSCLC). Ela foi derivada de um paciente adulto e faz parte do painel de modelos de neoplasias malignas torácicas desenvolvido pelo Departamento de Oncologia Médica do NCI-Marinha. A linhagem celular apresenta morfologia epitelial e comportamento de crescimento aderente in vitro, tornando-a adequada para sistemas de cultura em monocamada. É normalmente mantida em meio RPMI-1640 suplementado com 10% de soro fetal bovino e incubada em condições padrão (37 °C, 5% de CO₂).

Em nível molecular, a NCI-H211 apresenta mutações consistentes com a patogênese do NSCLC. Especificamente, ela possui uma mutação ativadora do KRAS, uma característica marcante de um subconjunto de adenocarcinomas pulmonares que impulsiona a sinalização oncogênica por meio das vias MAPK e PI3K/AKT. Essa mutação contribui para a resistência da linhagem celular a certas terapias direcionadas, particularmente inibidores do EGFR, ao mesmo tempo em que a torna um modelo útil para o estudo de estratégias terapêuticas direcionadas ao KRAS. Estudos de perfilagem em nível proteico, como aqueles que utilizam matrizes de proteínas em fase reversa (RPPA), identificaram a NCI-H211 entre os modelos de câncer de pulmão com mutação no KRAS que apresentam dependências específicas de sinalização, auxiliando na identificação de biomarcadores e alvos terapêuticos.

A NCI-H211 tem sido destaque em triagens proteômicas e farmacológicas em larga escala e tem sido utilizada para avaliar a sensibilidade a medicamentos e os padrões de expressão proteica. Essas características a tornam um modelo eficaz para pesquisas translacionais focadas no desenvolvimento de abordagens terapêuticas para o NSCLC induzido por KRAS e na investigação de mecanismos de resistência associados a agentes direcionados e citotóxicos.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.