Siirry sisältöön
NCI-H211
Kudos
Metastaattinen
Sairaus
Keuhkojen pienisoluinen karsinooma
Synonyymit
H211, H-211, NCIH211

Asiakirjat

NCI-H211

Cell line · Tuotenumero 305837

NCI-H211 is a human lung carcinoma cell line classified as non-small cell lung cancer (NSCLC). It was derived from an adult patient and is part of the pan...

€700.00ilman veroja ja toimituskuluja

Räätälöinti / Suositukset

Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

NCI-H211 on ihmisen keuhkosyöpäsolulinja, joka luokitellaan ei-pienisoluiseen keuhkosyöpään (NSCLC). Se on peräisin aikuispotilaalta ja kuuluu NCI-Navy Medical Oncology Branchin kehittämään rintasyövän mallien paneeliin. Solulinja osoittaa epiteelimorfologiaa ja adheesiivista kasvukäyttäytymistä in vitro, mikä tekee siitä sopivan yksikerroksisiin viljelyjärjestelmiin. Sitä ylläpidetään tyypillisesti RPMI-1640-viljelyalustalla, johon on lisätty 10 % sikiön naudan seerumia, ja inkuboidaan standardiolosuhteissa (37 °C, 5 % CO₂).

Molekyylitasolla NCI-H211 sisältää mutaatioita, jotka ovat yhdenmukaisia NSCLC:n patogeneesin kanssa. Erityisesti se sisältää aktivoivan KRAS-mutaation, joka on tyypillinen piirre osalle keuhkojen adenokarsinoomista ja joka ajaa onkogeenistä signalointia MAPK- ja PI3K/AKT-reittien kautta. Tämä mutaatio lisää solulinjan resistenssiä tietyille kohdennetuille terapioille, erityisesti EGFR-estäjille, ja tekee siitä samalla hyödyllisen mallin KRAS-suuntautuneiden terapeuttisten strategioiden tutkimiseen. Proteiinitasolla tehdyt profilointitutkimukset, kuten käänteisfaasiproteiinijärjestelyt (RPPA), ovat tunnistaneet NCI-H211:n KRAS-mutanttien keuhkosyöpämallien joukosta, joilla on erityisiä signaaliriippuvuuksia, mikä auttaa biomarkkerien ja terapeuttisten kohteiden tunnistamisessa.

NCI-H211 on ollut esillä laajamittaisissa proteomiikka- ja farmakologisissa seulonnoissa, ja sitä on käytetty lääkeherkkyyden ja proteiineiden ilmentymismallien arviointiin. Nämä ominaisuudet tekevät siitä tehokkaan mallin translaatiotutkimukselle, joka keskittyy KRAS-mutaatioihin perustuvan NSCLC:n hoitomenetelmien kehittämiseen ja kohdennettujen ja sytotoksisten aineiden resistenssimekanismien tutkimiseen.

Kudos
Metastaattinen
Sairaus
Keuhkojen pienisoluinen karsinooma
Synonyymit
  • H211
  • H-211
  • NCIH211

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Jousitus
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Karyotyyppi
Iso(3p), t(3;4)(pter-q12), t(3;11)(qter-p25)

04Tunnisteet

Lähdeviite
NCI-H211 (Cytion-tuotenumero 305837)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_1529

05Ilmentyminen ja alttius

Mutaatioprofiili
Mutaatio: TP53, yksinkertainen, p.Arg248Gln (c.743G>A), määrittelemätön (PubMed=1312696, PubMed=1565469)

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Ei mitään
Kylvötiheys
0,1–1 x 106 solua/ml
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
50 vuotta
Etnisyys
Kaukasialainen