CHO-K1 suspension adapted

Les cellules CHO-K1 constituent une sous-lignée dérivée de la lignée cellulaire CHO, initialement établie au début des années 1950 à partir d’un ovaire de hamster chinois. Les cellules CHO-K1 sont largement utilisées dans la production d’anticorps monoclonaux thérapeutiques et d’autres produits biopharmaceutiques. Leur utilisation généralisée dans la production de protéines biopharmaceutiques et de vaccins s’explique par leur nature eucaryote, qui permet un repliement, un assemblage et des modifications post-traductionnelles appropriés, comme la glycosylation, ce qui influe sur la stabilité, l’efficacité et l’innocuité des protéines produites.

Dans le domaine de la production de protéines recombinantes, la lignée cellulaire CHO-K1 est utilisée pour exprimer un large éventail de protéines, notamment des anticorps monoclonaux, des facteurs de croissance, des cytokines et des enzymes. Ces protéines trouvent des applications dans les traitements thérapeutiques, les tests diagnostiques et les formulations vaccinales.

Les cellules CHO-K1 présentent un taux de croissance élevé et s’adaptent à diverses conditions de culture, notamment en suspension et en culture adhérente, ce qui les rend très précieuses pour les procédés de bioproduction à grande échelle. Elles possèdent un haut niveau de stabilité génétique et sont utilisées pour le développement de lignées cellulaires stables, car elles sont capables d’amplifier et d’exprimer efficacement des gènes exogènes, ce qui est essentiel pour obtenir des rendements élevés de protéines recombinantes.

Les cellules CHO-K1 de hamster chinois peuvent être facilement transfectées avec divers vecteurs pour l’expression génique, ce qui facilite l’édition ou l’inhibition génique. Cette flexibilité permet aux chercheurs d’introduire des gènes spécifiques, de faire taire des gènes, voire d’effectuer une édition génique ciblée à l’aide de technologies telles que CRISPR-Cas9 dans les cellules hôtes CHO-K1.

En conclusion, les cellules CHO-K1 de hamster chinois et les cellules CHO jouent un rôle central dans la recherche biotechnologique et la production biopharmaceutique, offrant une plateforme polyvalente pour l’étude de la fonction des gènes et la production à grande échelle de protéines recombinantes.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée. Les cellules doivent être cultivées sur un agitateur orbital, dans des flacons Erlenmeyer à cloisons, à une vitesse de 110 tr/min.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.