Gå til innholdet
CHO-K1 suspension adapted
Vev
Eggstokk
Synonymer
CHO K1, CHOK1, CHO cell clone K1, GM15452

Dokumenter

CHO-K1 suspension adapted

Cell line · Produktnummer 603486

CHO-K1 cells are a subline derived from the CHO cell line, which was originally established in the early 1950s from a Chinese hamster ovary. CHO-K1 cells ...

€430.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

CHO-K1-celler er en sublinje avledet fra CHO-cellelinjen, som opprinnelig ble etablert på begynnelsen av 1950-tallet fra eggstokken til en kinesisk hamster. CHO-K1-celler er mye brukt i produksjonen av terapeutiske monoklonale antistoffer og andre biofarmasøytiske produkter. Den utstrakte bruken av CHO-K1-celler til produksjon av biofarmasøytiske proteiner og vaksiner skyldes deres eukaryote natur, som muliggjør riktig folding, montering og posttranslasjonelle modifikasjoner som glykosylering, noe som påvirker stabiliteten, effekten og sikkerheten til de produserte proteinene.

Når det gjelder rekombinant proteinproduksjon, brukes CHO-K1-cellelinjen til å uttrykke en lang rekke proteiner, blant annet monoklonale antistoffer, vekstfaktorer, cytokiner og enzymer. Disse proteinene kan brukes i terapeutiske behandlinger, diagnostiske analyser og vaksineformuleringer.

CHO-K1-celler har en robust veksthastighet og kan tilpasses ulike dyrkingsforhold, inkludert suspensjonskulturer og adherente kulturer, noe som gjør dem svært verdifulle for bioproduksjonsprosesser i stor skala. De har en høy grad av genetisk stabilitet og brukes til utvikling av stabile cellelinjer fordi de er i stand til å amplifisere og uttrykke eksogene gener på en effektiv måte, noe som er avgjørende for å kunne produsere rekombinante proteiner med høyt utbytte.

CHO-K1-celler fra kinesisk hamster kan enkelt transfekteres med en rekke vektorer for genuttrykk, noe som muliggjør genredigering eller knockdown. Denne fleksibiliteten gjør det mulig for forskere å introdusere spesifikke gener, dempe gener eller til og med utføre målrettet genredigering ved hjelp av teknologier som CRISPR-Cas9 i CHO-K1-vertceller.

CHO-K1-celler fra kinesiske hamstere og CHO-celler er sentrale i bioteknologisk forskning og biofarmasøytisk produksjon, og de utgjør en allsidig plattform for studier av genfunksjon og storskala produksjon av rekombinante proteiner.

Vev
Eggstokk
Søknader
Denne cellelinjen er et optimalt valg for toksikologi, industriell bioteknologi og bioproduksjon.
Synonymer
  • CHO K1
  • CHOK1
  • CHO cell clone K1
  • GM15452

02Klassifisering

Organisme
Kinesisk hamster
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Oppheng
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitel-lignende
Karyotype
Kromosomfrekvensfordeling 50 celler: 2n = 22. Stamlinjetallet er hypodiploid
Fordoblingstid
22 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
Tilpasset CHO-K1-suspensjon (Cytion-katalognummer 603486)
NCBI-skattenummer
10029
Cellosaurus
CVCL_0214

05Uttrykk og mottakelighet

Virusfølsomhet
Vesikulær stomatitt (Indiana), Getah-virus Virusresistens: poliovirus 2, modoc-virus, Button Willow-virus
Revers transkriptase
Negativ

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
CD CHO fra ThermoFisher, serumfritt og klart til bruk.
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 % CO₂, fuktet atmosfære. Cellene må dyrkes på en orbitalrister i Erlenmeyer-rysteflasker med skillevegger ved 110 o/min.

Kosttilskudd
L-glutamin: Tilsett slik at den endelige konsentrasjonen blir 8 mM (vanligvis 40 ml per liter av en 200 mM stamløsning) før bruk. Dette er obligatorisk for CD CHO. Tilsett antiklumpemiddel i forholdet 1:100 og HT-tilskudd i forholdet 1:100 til cellesuspensjonen.
Dissosiasjonsmiddel
Ingen
Subkultivering
Homogeniser cellesuspensjonen i kolben forsiktig ved å pipettere opp og ned, og ta deretter en representativ prøve for å bestemme celletettheten per ml. Fortynn suspensjonen til en cellekonsentrasjon på 1 x 105 celler/ml med ferskt dyrkningsmedium, og fordel den justerte suspensjonen i nye kolber for videre dyrking.
Såtetthet
4 × 10⁵ celler/ml
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
Voksen