Přejít na obsah
CHO-K1 suspension adapted
Tkáň
Ovarium
Synonyma
CHO K1, CHOK1, CHO cell clone K1, GM15452

Dokumenty

CHO-K1 suspension adapted

Cell line · Číslo výrobku 603486

CHO-K1 cells are a subline derived from the CHO cell line, which was originally established in the early 1950s from a Chinese hamster ovary. CHO-K1 cells ...

€430.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buňky CHO-K1 jsou podlinie odvozená od buněčné linie CHO, která byla původně vytvořena na počátku 50. let 20. století z vaječníků čínského křečka. Buňky CHO-K1 jsou široce využívány při výrobě terapeutických monoklonálních protilátek a dalších biofarmak. Jejich široké využití při výrobě biofarmaceutických proteinů a vakcín je dáno jejich eukaryotickou povahou, která umožňuje správné skládání, sestavování a posttranslační modifikace, jako je glykosylace, což ovlivňuje stabilitu, účinnost a bezpečnost vyráběných proteinů.

V oblasti výroby rekombinantních proteinů se buněčná linie CHO-K1 používá k expresi široké škály proteinů, včetně monoklonálních protilátek, růstových faktorů, cytokinů a enzymů. Tyto proteiny se používají v terapeutické léčbě, diagnostických testech a při výrobě vakcín.

Buňky CHO-K1 vykazují robustní rychlost růstu a jsou přizpůsobivé různým kultivačním podmínkám, včetně suspenzních a adherentních kultur, což je činí velmi cennými pro rozsáhlé bioprodukční procesy. Mají vysokou úroveň genetické stability a používají se pro vývoj stabilních buněčných linií, protože jsou schopny účinně amplifikovat a exprimovat exogenní geny, což je rozhodující pro produkci vysokých výtěžků rekombinantních proteinů.

Buňky čínského křečka CHO-K1 lze snadno transfekovat různými vektory pro genovou expresi, což usnadňuje úpravu nebo vyřazení genů. Tato flexibilita umožňuje výzkumníkům zavádět specifické geny, umlčovat geny nebo dokonce provádět cílenou úpravu genů pomocí technologií, jako je CRISPR-Cas9, v hostitelských buňkách CHO-K1.

Závěrem lze říci, že buňky čínského křečka CHO-K1 a buňky CHO mají klíčové postavení v biotechnologickém výzkumu a výrobě biofarmak a nabízejí všestrannou platformu pro studium funkce genů a rozsáhlou výrobu rekombinantních proteinů.

Tkáň
Ovarium
Aplikace
Tato buněčná linie je optimální volbou pro toxikologii, průmyslovou biotechnologii a bioprodukci.
Synonyma
  • CHO K1
  • CHOK1
  • CHO cell clone K1
  • GM15452

02Klasifikace

Organismus
čínský křeček
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Odpružení
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné
Karyotyp
Rozložení četnosti chromozomů 50 buněk: 2n = 22. Kmenové číslo je hypodiploidní
Doba zdvojnásobení
22 hodin

04Identifikátory

Citace
Upravená suspenze CHO-K1 (katalogové číslo Cytion 603486)
Daňové identifikační číslo NCBI
10029
Cellosaurus
CVCL_0214

05Exprese a náchylnost

Náchylnost k virům
Vesikulární stomatitida (Indiana), Getah virus Rezistentní viry: poliovirus 2, modoc virus, Button Willow virus
Reverzní transkriptáza
Negativní

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
CD CHO od společnosti ThermoFisher, bez séra, připravené k použití.
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 % CO₂, zvlhčená atmosféra. Buňky je třeba kultivovat na orbitálním třepači v Erlenmeyerových třepacích baňkách s přepážkami při 110 ot./min.

Doplňky stravy
L-glutamin: před použitím doplňte na konečnou koncentraci 8 mM (obvykle 40 ml na litr 200 mM zásobního roztoku). U buněk CD CHO je to povinné. Do buněčné suspenze přidejte prostředek proti shlukování v poměru 1:100 a doplněk HT v poměru 1:100.
Disociační činidlo
Žádný
Subkultivace
Jemně homogenizujte buněčnou suspenzi v baňce pipetováním nahoru a dolů, poté odeberte reprezentativní vzorek pro stanovení buněčné hustoty na ml. Suspenzi zřeďte čerstvým kultivačním médiem tak, aby koncentrace buněk byla 1 x 105 buněk/ml, a upravenou suspenzi rozdělte do nových baňek pro další kultivaci.
Hustota výsevu
4 × 105 buněk/ml
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
Dospělí