CHO-K1 suspension adapted
Cell line · Номер на продукта 603486
CHO-K1 cells are a subline derived from the CHO cell line, which was originally established in the early 1950s from a Chinese hamster ovary. CHO-K1 cells ...
Персонализиране / Препоръки
- CHO-K1 suspension adaptedCell line€430.00
Препоръчани (най-новата партида)
01Обща информация
- Описание
Клетките CHO-K1 са подлиния, получена от клетъчната линия CHO, която първоначално е създадена в началото на 50-те години на миналия век от яйчник на китайски хамстер. Клетките CHO-K1 се използват широко при производството на терапевтични моноклонални антитела и други биофармацевтични продукти. Широкото им използване в производството на биофармацевтични протеини и ваксини се дължи на тяхната еукариотна природа, която позволява правилно нагъване, сглобяване и посттранслационни модификации, като например гликозилиране, което влияе върху стабилността, ефикасността и безопасността на произведените протеини.
В областта на производството на рекомбинантни протеини клетъчната линия CHO-K1 се използва за експресия на широк спектър от протеини, включително моноклонални антитела, растежни фактори, цитокини и ензими. Тези белтъци намират приложение в терапевтични лечения, диагностични тестове и ваксини.
Клетките CHO-K1 се характеризират със стабилен темп на растеж и са приспособими към различни условия на култивиране, включително суспензионни и адхезивни култури, което ги прави изключително ценни за широкомащабни процеси на биопроизводство. Те притежават високо ниво на генетична стабилност и се използват за разработване на стабилни клетъчни линии, тъй като са способни да амплифицират и експресират екзогенни гени ефективно, което е от решаващо значение за производството на високи добиви на рекомбинантни протеини.
Клетките на китайския хамстер CHO-K1 могат лесно да бъдат трансфектирани с различни вектори за генна експресия, което улеснява редактирането на гени или тяхното изключване. Тази гъвкавост позволява на изследователите да въвеждат специфични гени, да заглушават гени или дори да извършват целенасочено редактиране на гени с помощта на технологии като CRISPR-Cas9 в клетките-носители CHO-K1.
В заключение, клетките CHO-K1 на китайския хамстер и клетките CHO имат ключово значение за биотехнологичните изследвания и биофармацевтичното производство, като предлагат универсална платформа за изследване на функцията на гените и широкомащабно производство на рекомбинантни протеини.
- Тъкан
- Яйчник
- Приложения
- Тази клетъчна линия е оптимален избор за токсикологията, промишлените биотехнологии и биопроизводството.
- Синоними
- CHO K1
- CHOK1
- CHO cell clone K1
- GM15452
02Класификация
- Организъм
- Китайски хамстер
- Секс
- Женски
- Свойства, свързани с растежа
- Окачване
- Ниво на биологична безопасност
- 1
03Характеристики
- Морфология
- Подобни на епител
- Кариотип
- Разпределение на честотата на хромозомите 50 клетки: 2n = 22. Стволовидният номер е хиподиплоиден
- Време за удвояване
- 22 часа
04Идентификатори
- Източник
- Адаптирана суспензия CHO-K1 (каталожен номер на Cytion 603486)
- Данъчен идентификационен номер в NCBI
- 10029
- Целозавър
- CVCL_0214
05Проява и предразположеност
- Податливост към вируси
- Везикуларен стоматит (Индиана), вирус на Гета Устойчивост на вируси: полиовирус 2, вирус на Модок, вирус на Върбата на бутоните
- Обратна транскриптаза
- Отрицателен
06Обработка и отглеждане
- Хранителна среда
- CD CHO ThermoFisher, без серум, готов за употреба.
- Атмосфера за инкубация
37 °C, 5 % CO₂, овлажнена атмосфера. Клетките трябва да се култивират на орбитален шейкър в шейкърни колби „Ерленмайер“ с прегради при 110 об./мин.
- Добавки
- L-глутамин: добавете до крайна концентрация 8 mM (обикновено 40 мл на литър от 200 mM разтвор) преди употреба. Това е задължително за CD CHO. Добавете средство против слепване в съотношение 1:100 и HT добавка в съотношение 1:100 към клетъчната суспензия.
- Реагент за дисоциация
- Няма
- Пресаждане
- Нежно хомогенизирайте клетъчната суспензия в колбата, като я пипетирате нагоре и надолу, след което вземете представителна проба, за да определите клетъчната плътност на мл. Разредете суспензията, за да постигнете клетъчна концентрация от 1 x 105 клетки/мл с прясна културална среда, и разпределете коригираната суспензия в нови колби за по-нататъшно култивиране.
- Плътност на засяването
- 4 × 10⁵ клетки/мл
- Обновяване на течността
- 2 до 3 пъти седмично
- Размразяване и култивиране
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Контрол на качеството и криоконсервация
- Стерилност
Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.
За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.
- Среда за замразяване
- Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
- Условия за съхранение
За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.
- Условия за доставка
Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.
08Дарител
- Възраст на донора
- Възрастни
09Правни въпроси и безопасност
- Мерки за безопасност
- Когато планирате да съхранявате криопрепарат в течен азот за бъдещо размразяване, е задължително да спазвате строги мерки за безопасност. Подходящите защитни ръкавици и облекло са от съществено значение, а по време на прехвърлянето на замразени проби към или от резервоара с течен азот е необходимо да се използва маска за лице или предпазни очила. Това се прави, за да се намали рискът от нараняване от потенциални експлозии на криовиолите при изваждането им, които могат да доведат до изхвърляне на остри фрагменти.
- Отказ от отговорност
- Нашите клетки се предоставят изключително за целите на лабораторни изследвания in vitro и не са предназначени за клинична или диагностична употреба, нито да се прилагат на хора или да се използват за ветеринарни цели. Потребителите трябва да се придържат към всички приложими насоки и разпоредби за боравене и използване на тези клетки в изследователска среда.
- Гаранция
Ние в Cytion заставаме зад качеството и жизнеспособността на нашите продукти. Гарантираме, че нашите клетки ще бъдат жизнеспособни в началото на култивирането в продължение на 60 дни след изпращането им от нашите съоръжения. Гарантираме, че всички материали отговарят на спецификациите, описани в сертификата за анализ и/или продуктовата листа
За пълни подробности, моля, направете справка с нашата <a href=""/Кои сме ние/Гаранция/"" hreflang=""x-default"">Гаранционна декларация
- Необходимо е споразумение за прехвърляне на материали
- Да
