Skip to content
CHO-K1 suspension adapted
Tissue
รังไข่
Synonyms
CHO K1, CHOK1, CHO cell clone K1, GM15452

Documents

CHO-K1 suspension adapted

Cell line · Product number 603486

CHO-K1 cells are a subline derived from the CHO cell line, which was originally established in the early 1950s from a Chinese hamster ovary. CHO-K1 cells ...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ CHO-K1 เป็นสายพันธุ์ย่อยที่ได้มาจากเซลล์ไลน์ CHO ซึ่งถูกสร้างขึ้นครั้งแรกในช่วงต้นทศวรรษ 1950 จากรังไข่ของหนูแฮมสเตอร์จีนเซลล์ CHO-K1 ถูกนำมาใช้อย่างแพร่หลายในการผลิตแอนติบอดีโมโนโคลนอลเชิงบำบัดและชีวเภสัชภัณฑ์อื่น ๆ การใช้งานอย่างกว้างขวางในกระบวนการผลิตโปรตีนสำหรับชีวเภสัชภัณฑ์และวัคซีนนั้น มีสาเหตุมาจากลักษณะของเซลล์ที่เป็นยูคาริโอต ซึ่งเอื้อให้เกิดการพับตัว การประกอบโครงสร้าง และการปรับเปลี่ยนหลังการแปลรหัสโปรตีน เช่น การเติมน้ำตาล (glycosylation) ได้อย่างเหมาะสม ปัจจัยเหล่านี้ส่งผลต่อความคงตัว ประสิทธิภาพ และความปลอดภัยของโปรตีนที่ผลิตได้

ในขอบเขตของการผลิตโปรตีนรีคอมบิแนนท์ สายพันธุ์เซลล์ CHO-K1 ถูกนำมาใช้เพื่อแสดงออกโปรตีนหลากหลายชนิด รวมถึงแอนติบอดีโมโนโคลนอล, ปัจจัยการเจริญเติบโต, ไซโตไคน์, และเอนไซม์ โปรตีนเหล่านี้มีการประยุกต์ใช้ในด้านการรักษา, การทดสอบวินิจฉัย, และการพัฒนาวัคซีน

เซลล์ CHO-K1 แสดงอัตราการเจริญเติบโตที่แข็งแกร่งและสามารถปรับตัวเข้ากับสภาวะการเพาะเลี้ยงที่หลากหลาย รวมถึงการเพาะเลี้ยงแบบแขวนลอยและแบบเกาะติด ทำให้มีคุณค่าสูงสำหรับกระบวนการผลิตชีวภาพขนาดใหญ่ เซลล์เหล่านี้มีความเสถียรทางพันธุกรรมในระดับสูงและถูกใช้ในการพัฒนาสายพันธุ์เซลล์ที่คงที่ เนื่องจากสามารถขยายและแสดงออกของยีนจากภายนอกได้อย่างมีประสิทธิภาพ ซึ่งเป็นสิ่งสำคัญสำหรับการผลิตโปรตีนรีคอมบิแนนท์ในปริมาณสูง

เซลล์ CHO-K1 ของหนูแฮมสเตอร์จีนสามารถถูกทรานส์เฟคได้อย่างง่ายดายด้วยเวกเตอร์หลากหลายชนิดสำหรับการแสดงออกของยีน ซึ่งช่วยอำนวยความสะดวกในการแก้ไขยีนหรือการลดการแสดงออกของยีน ความยืดหยุ่นนี้ทำให้นักวิจัยสามารถแนะนำยีนเฉพาะ ปิดเสียงยีน หรือแม้กระทั่งทำการแก้ไขยีนแบบเฉพาะเจาะจงโดยใช้เทคโนโลยีเช่น CRISPR-Cas9 ในเซลล์โฮสต์ CHO-K1

โดยสรุป เซลล์ CHO-K1 ของหนูแฮมสเตอร์จีนและเซลล์ CHO มีความสำคัญอย่างยิ่งในการวิจัยทางเทคโนโลยีชีวภาพและการผลิตยาชีวเภสัชภัณฑ์ โดยเป็นแพลตฟอร์มที่หลากหลายสำหรับการศึกษาการทำงานของยีนและการผลิตโปรตีนรีคอมบิแนนท์ในปริมาณมาก

Tissue
รังไข่
Applications
สายเซลล์นี้เป็นตัวเลือกที่เหมาะสมที่สุดสำหรับการศึกษาพิษวิทยา เทคโนโลยีชีวภาพอุตสาหกรรม และการผลิตทางชีวภาพ
Synonyms
  • CHO K1
  • CHOK1
  • CHO cell clone K1
  • GM15452

02Classification

Organism
Chinese hamster
Sex
Female
Growth properties
Suspension
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
Karyotype
การกระจายความถี่ของโครโมโซม 50 เซลล์: 2n = 22. หมายเลขสายพันธุ์เป็นไฮโพไดพลอยด์
Doubling time
22 ชั่วโมง

04Identifiers

Citation
เซลล์ CHO-K1 ในสารแขวนลอยที่ปรับแต่งแล้ว (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 603486)
NCBI TaxID
10029
Cellosaurus
CVCL_0214

05Expression and susceptibility

Virus susceptibility
โรคปากและเท้าเปื่อย (อินเดียนา), ไวรัสเกต้า ไวรัสที่ต้านทาน: โปลิโอไวรัส 2, ไวรัสโมด็อก, ไวรัสบัตตันวิลโลว์
Reverse transcriptase
เชิงลบ

06Handling and culture

Culture medium
CD CHO ThermoFisher, ไม่มีเซรั่ม พร้อมใช้ทันที
Incubation atmosphere

37°C, CO₂ 5%, สภาพแวดล้อมที่มีความชื้น. เซลล์ต้องถูกเพาะเลี้ยงบนเครื่องสั่นแบบวงโคจร ในขวด Erlenmeyer ที่มีแผ่นกั้น ที่ความเร็ว 110 รอบต่อนาที

Supplements
L-กลูตามีน: เพิ่มให้ถึง 8 mM (โดยทั่วไป 40 mL ต่อ 1 ลิตรของสารละลายสต็อก 200 mM) ก่อนใช้งาน สิ่งนี้เป็นข้อบังคับสำหรับ CD CHO ให้เพิ่มสารป้องกันการจับตัวเป็นก้อนในอัตราส่วน 1:100 และสารเสริม HT ในอัตราส่วน 1:100 ลงในสารแขวนลอยเซลล์
Dissociation reagent
ไม่มี
Subculturing
ค่อยๆ ปรับให้เซลล์ในขวดมีความสม่ำเสมอโดยการดูดและปล่อยขึ้นลง จากนั้นนำตัวอย่างที่เป็นตัวแทนมาเพื่อกำหนดความหนาแน่นของเซลล์ต่อมิลลิลิตร เจือจางสารแขวนลอยให้ได้ความเข้มข้นของเซลล์ 1 x 105 เซลล์/มิลลิลิตร ด้วยอาหารเลี้ยงเชื้อใหม่ และแบ่งสารแขวนลอยที่ปรับแล้วใส่ขวดใหม่สำหรับการเพาะเลี้ยงต่อไป
Seeding density
4 × 10⁵ เซลล์/มิลลิลิตร
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
ผู้ใหญ่