Gå direkte til indholdet
CHO-K1 suspension adapted
Væv
Æggestokkene
Synonymer
CHO K1, CHOK1, CHO cell clone K1, GM15452

Dokumenter

CHO-K1 suspension adapted

Cell line · Varenummer 603486

CHO-K1 cells are a subline derived from the CHO cell line, which was originally established in the early 1950s from a Chinese hamster ovary. CHO-K1 cells ...

€430.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

CHO-K1-celler er en sublinje, der stammer fra CHO-cellelinjen, som oprindeligt blev etableret i begyndelsen af 1950'erne fra en ovarie fra en kinesisk hamster. CHO-K1-celler anvendes i vid udstrækning til produktion af terapeutiske monoklonale antistoffer og andre biofarmaceutiske produkter. Deres omfattende brug i biofarmaceutisk proteinproduktion og vacciner tilskrives deres eukaryote natur, som giver mulighed for korrekt foldning, samling og posttranslationelle modifikationer som glykosylering, hvilket påvirker de producerede proteiners stabilitet, effektivitet og sikkerhed.

Inden for rekombinant proteinproduktion bruges CHO-K1-cellelinjen til at udtrykke en lang række proteiner, herunder monoklonale antistoffer, vækstfaktorer, cytokiner og enzymer. Disse proteiner anvendes i terapeutiske behandlinger, diagnostiske assays og vaccineformuleringer.

CHO-K1-celler udviser en robust væksthastighed og kan tilpasses forskellige dyrkningsforhold, herunder suspensionskulturer og adhærente kulturer, hvilket gør dem meget værdifulde til bioproduktionsprocesser i stor skala. De har en høj grad af genetisk stabilitet og bruges til udvikling af stabile cellelinjer, da de er i stand til at forstærke og udtrykke eksogene gener effektivt, hvilket er afgørende for at producere høje udbytter af rekombinante proteiner.

CHO-K1 kinesiske hamsterceller kan let transfekteres med en række forskellige vektorer til genekspression, hvilket muliggør genredigering eller knockdown. Denne fleksibilitet gør det muligt for forskere at introducere specifikke gener, slå gener fra eller endda udføre målrettet genredigering ved hjælp af teknologier som CRISPR-Cas9 i CHO-K1-værtsceller.

Konklusionen er, at CHO-K1-celler fra kinesiske hamstere og CHO-celler er centrale i bioteknologisk forskning og biofarmaceutisk produktion, idet de tilbyder en alsidig platform til undersøgelse af genfunktion og produktion af rekombinante proteiner i stor skala.

Væv
Æggestokkene
Anvendelser
Denne cellelinje er et optimalt valg til toksikologi, industriel bioteknologi og bioproduktion.
Synonymer
  • CHO K1
  • CHOK1
  • CHO cell clone K1
  • GM15452

02Klassificering

Organisme
Kinesisk hamster
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Affjedring
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende
Karyotype
Kromosomfrekvensfordeling 50 celler: 2n = 22. Stamlinjetallet er hypodiploid
Fordoblingstid
22 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
Tilpasset CHO-K1-suspension (Cytion-katalognummer 603486)
NCBI-skattenummer
10029
Cellosaurus
CVCL_0214

05Udtryk og modtagelighed

Virusfølsomhed
Vesikulær stomatitis (Indiana), Getah-virus Virusresistens: poliovirus 2, modoc-virus, Button Willow-virus
Revers transkriptase
Negativ

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
CD CHO fra ThermoFisher, serumfri og klar til brug.
Inkubationsatmosfære

37 °C, 5 % CO₂, befugtet atmosfære. Cellerne skal dyrkes på en orbitalryster i Erlenmeyer-rystekolber med skillevægge ved 110 omdrejninger pr. minut.

Kosttilskud
L-glutamin: Tilsæt, så den endelige koncentration bliver 8 mM (typisk 40 ml pr. liter af en 200 mM stamopløsning) før brug. Dette er obligatorisk for CD CHO. Tilsæt antiklumpningsmiddel i forholdet 1:100 og HT-tilskud i forholdet 1:100 til cellesuspensionen.
Dissociationsreagens
Ingen
Oddyrkning
Homogeniser forsigtigt cellesuspensionen i kolben ved at pipettere op og ned, og tag derefter en repræsentativ prøve for at bestemme celletætheden pr. ml. Fortynd suspensionen til en cellekoncentration på 1 x 105 celler/ml med frisk dyrkningsmedium, og fordel den justerede suspension i nye kolber til videre dyrkning.
Såtæthed
4 × 10⁵ celler/ml
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
Voksen