Tartalomra ugrás
CHO-K1 suspension adapted
Szövet
Petefészek
Szinonimák
CHO K1, CHOK1, CHO cell clone K1, GM15452

Dokumentumok

CHO-K1 suspension adapted

Cell line · Termékszám 603486

CHO-K1 cells are a subline derived from the CHO cell line, which was originally established in the early 1950s from a Chinese hamster ovary. CHO-K1 cells ...

€430.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A CHO-K1 sejtek az eredetileg az 1950-es évek elején kínai hörcsög petefészekből létrehozott CHO sejtvonal egyik alvonala. A CHO-K1 sejteket széles körben használják terápiás monoklonális antitestek és más biofarmakonok előállítására. A biogyógyszerészeti fehérjék és vakcinák előállításában való széles körű felhasználásuk eukarióta természetüknek köszönhető, amely lehetővé teszi a megfelelő hajtogatást, összeszerelést és poszttranszlációs módosításokat, mint például a glikozilációt, ami befolyásolja a termelt fehérjék stabilitását, hatékonyságát és biztonságosságát.

A rekombináns fehérjék előállítása terén a CHO-K1 sejtvonalat fehérjék széles skálájának kifejezésére használják, beleértve a monoklonális antitesteket, növekedési faktorokat, citokineket és enzimeket. Ezeket a fehérjéket terápiás kezelésekben, diagnosztikai vizsgálatokban és vakcinaformulákban alkalmazzák.

A CHO-K1 sejtek robusztus növekedési sebességet mutatnak, és alkalmazkodnak a különböző tenyésztési körülményekhez, beleértve a szuszpenziós és adherens kultúrákat is, ami rendkívül értékessé teszi őket a nagyszabású bioprodukciós folyamatokban. Nagyfokú genetikai stabilitással rendelkeznek, és stabil sejtvonalak fejlesztésére használják őket, mivel képesek az exogén gének hatékony felerősítésére és expressziójára, ami kritikus fontosságú a rekombináns fehérjék nagy hozamának előállításához.

A CHO-K1 kínai hörcsögsejtek könnyen transzfektálhatók különböző vektorokkal a génexpresszióhoz, megkönnyítve a génszerkesztést vagy a kopogtatást. Ez a rugalmasság lehetővé teszi a kutatók számára, hogy specifikus géneket vezessenek be, géneket csendesítsenek el, vagy akár célzott génszerkesztést végezzenek olyan technológiák segítségével, mint a CRISPR-Cas9 a CHO-K1 gazdasejtekben.

Összefoglalva, a kínai hörcsög CHO-K1 sejtek és a CHO sejtek kulcsfontosságúak a biotechnológiai kutatásban és a biofarmáciai termelésben, mivel sokoldalú platformot kínálnak a génműködés tanulmányozásához és a rekombináns fehérjék nagyüzemi előállításához.

Szövet
Petefészek
Alkalmazások
Ez a sejtvonal optimális választás a toxikológia, az ipari biotechnológia és a bioprodukció számára.
Szinonimák
  • CHO K1
  • CHOK1
  • CHO cell clone K1
  • GM15452

02Osztályozás

Organizmus
kínai hörcsög
Szex
Nő
Növekedési tulajdonságok
Felfüggesztés
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelszerű
Kariotípus
Kromoszóma gyakorisági eloszlás 50 sejt: 2n = 22. A törzsszám hipodiploid
Kettőzési idő
22 óra

04Azonosítók

Hivatkozás
Módosított CHO-K1 szuszpenzió (Cytion katalógusszám: 603486)
NCBI adóazonosító szám
10029
Cellosaurus
CVCL_0214

05Kifejeződés és fogékonyság

Vírusérzékenység
Vesicular stomatitis (Indiana), Getah vírus Vírusellenálló: poliovírus 2, modoc vírus, Button Willow vírus
Fordított transzkriptáz
Negatív

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
CD CHO ThermoFisher, szérummentes, azonnal felhasználható.
Inkubációs környezet

37 °C, 5% CO₂, párásított légkör. A sejteket orbitális rázógépen, elválasztófalakkal ellátott Erlenmeyer-rázólombikokban, 110 fordulat/perc sebességgel kell tenyészteni.

Kiegészítők
L-glutamin: használat előtt adagolja hozzá úgy, hogy a végső koncentráció 8 mM legyen (általában 40 ml egy liter 200 mM-es törzsoldatból). Ez a CD CHO esetében kötelező. Adjon a sejtszuszpenzióhoz 1:100 arányú csomósodásgátló szert és 1:100 arányú HT-kiegészítőt.
Diszociációs reagens
Nincs
Átültetés
A lombikban lévő sejtszuszpenziót óvatosan homogenizálja fel-le pipettázással, majd vegyen egy reprezentatív mintát a sejtsűrűség ml-enkénti meghatározásához. A szuszpenziót hígítsa friss tenyésztőközeggel 1 x 105 sejt/ml sejtkoncentráció eléréséig, majd az így beállított szuszpenziót új lombikokba osztva továbbtenyésztse.
Ültetési sűrűség
4 × 105 sejt/ml
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
Felnőtt