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CHO-K1 suspension adapted
Pañuelo de papel
Ovario
Sinónimos
CHO K1, CHOK1, CHO cell clone K1, GM15452

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CHO-K1 suspension adapted

Cell line · Número de producto 603486

CHO-K1 cells are a subline derived from the CHO cell line, which was originally established in the early 1950s from a Chinese hamster ovary. CHO-K1 cells ...

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01Información general

Descripción

Las células CHO-K1 son una sublínea derivada de la línea celular CHO, que se estableció originalmente a principios de la década de 1950 a partir de un ovario de hámster chino. Las células CHO-K1 se utilizan ampliamente en la producción de anticuerpos monoclonales terapéuticos y otros productos biofarmacéuticos. Su amplio uso en la producción de proteínas biofarmacéuticas y vacunas se atribuye a su naturaleza eucariota, que permite un plegamiento, ensamblaje y modificaciones postraduccionales adecuados, como la glicosilación, que influyen en la estabilidad, eficacia y seguridad de las proteínas producidas.

En el ámbito de la producción de proteínas recombinantes, la línea celular CHO-K1 se utiliza para expresar una amplia gama de proteínas, como anticuerpos monoclonales, factores de crecimiento, citocinas y enzimas. Estas proteínas tienen aplicaciones en tratamientos terapéuticos, ensayos de diagnóstico y formulaciones de vacunas.

Las células CHO-K1 presentan una tasa de crecimiento robusta y son adaptables a diversas condiciones de cultivo, incluidos los cultivos en suspensión y adherentes, lo que las hace muy valiosas para los procesos de bioproducción a gran escala. Poseen un alto nivel de estabilidad genética y se utilizan para el desarrollo de líneas celulares estables, ya que son capaces de amplificar y expresar genes exógenos de manera eficiente, lo que resulta crítico para producir altos rendimientos de proteínas recombinantes.

Las células CHO-K1 de hámster chino pueden transfectarse fácilmente con una gran variedad de vectores para la expresión de genes, lo que facilita su edición o eliminación. Esta flexibilidad permite a los investigadores introducir genes específicos, silenciar genes o incluso realizar una edición génica dirigida utilizando tecnologías como CRISPR-Cas9 en células huésped CHO-K1.

En conclusión, las células CHO-K1 de hámster chino y las células CHO son fundamentales en la investigación biotecnológica y la producción biofarmacéutica, ya que ofrecen una plataforma versátil para el estudio de la función génica y la producción a gran escala de proteínas recombinantes.

Pañuelo de papel
Ovario
Aplicaciones
Esta línea celular es una opción óptima para la toxicología, la biotecnología industrial y la bioproducción.
Sinónimos
  • CHO K1
  • CHOK1
  • CHO cell clone K1
  • GM15452

02Clasificación

Organismo
Hámster chino
Sexo
Mujer
Propiedades de crecimiento
Suspensión
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
De tipo epitelial
Cariotipo
Distribución de frecuencias cromosómicas 50 células: 2n = 22. El número de líneas madre es hipodiploide
Tiempo de duplicación
22 horas

04Identificadores

Referencia
Suspensión CHO-K1 adaptada (número de catálogo de Cytion: 603486)
N.º de identificación fiscal del NCBI
10029
Cellosaurus
CVCL_0214

05Expresión y susceptibilidad

Susceptibilidad a los virus
Estomatitis vesicular (Indiana), virus Getah Virus resistentes: poliovirus 2, virus modoc, virus Button Willow
Transcriptasa inversa
Negativo

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
CD CHO de ThermoFisher, sin suero y listo para usar.
Atmósfera de incubación

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada. Las células deben cultivarse en un agitador orbital, en matraces de Erlenmeyer con deflectores, a 110 rpm.

Suplementos
L-glutamina: añadir hasta alcanzar una concentración final de 8 mM (normalmente 40 ml por litro de una solución madre de 200 mM) antes de su uso. Esto es obligatorio para las células CHO CD. Añadir un agente antiaglomerante en una proporción de 1:100 y el suplemento HT en una proporción de 1:100 a la suspensión celular.
Reactivo de disociación
Ninguno
Subcultivo
Homogeneice suavemente la suspensión celular en el matraz pipeteando hacia arriba y hacia abajo, y luego tome una muestra representativa para determinar la densidad celular por ml. Diluya la suspensión para alcanzar una concentración celular de 1 x 105 células/ml con medio de cultivo fresco, y divida la suspensión ajustada en nuevos matraces para su posterior cultivo.
Densidad de siembra
4 × 105 células/ml
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Edad del donante
Adultos