Pāriet uz saturu
CHO-K1 suspension adapted
Audums
Olnīcas
Sinonīmi
CHO K1, CHOK1, CHO cell clone K1, GM15452

Dokumenti

CHO-K1 suspension adapted

Cell line · Preces numurs 603486

CHO-K1 cells are a subline derived from the CHO cell line, which was originally established in the early 1950s from a Chinese hamster ovary. CHO-K1 cells ...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

CHO-K1 šūnas ir apakšlīnija, kas atvasināta no CHO šūnu līnijas, kura sākotnēji tika izveidota pagājušā gadsimta 50. gadu sākumā no Ķīnas kāmja olnīcas. CHO-K1 šūnas plaši izmanto terapeitisko monoklonālo antivielu un citu biofarmaceitisko preparātu ražošanā. To plašais pielietojums biofarmaceitisko proteīnu un vakcīnu ražošanā ir saistīts ar to eikariotisko dabu, kas ļauj pareizi salocīties, montēties un veikt post-translācijas modifikācijas, piemēram, glikozilēšanu, kas ietekmē saražoto proteīnu stabilitāti, efektivitāti un drošību.

Rekombinantu olbaltumvielu ražošanas jomā CHO-K1 šūnu līniju izmanto, lai ekspresētu plašu olbaltumvielu klāstu, tostarp monoklonālās antivielas, augšanas faktorus, citokīnus un fermentus. Šos proteīnus izmanto terapeitiskās ārstēšanas, diagnostikas testos un vakcīnu preparātos.

CHO-K1 šūnām piemīt spēcīgs augšanas ātrums, un tās ir pielāgojamas dažādiem kultivēšanas apstākļiem, tostarp suspensijas un adherentām kultūrām, tāpēc tās ir ļoti vērtīgas liela mēroga bioprodukcijas procesos. Tām piemīt augsta līmeņa ģenētiskā stabilitāte, un tās izmanto stabilu šūnu līniju izstrādei, jo tās spēj efektīvi amplificēt un ekspresēt eksogēnus, kas ir ļoti svarīgi, lai iegūtu lielu daudzumu rekombinantu proteīnu.

CHO-K1 Ķīnas kāmja šūnas var viegli transficēt ar dažādiem vektoriem gēnu ekspresijai, atvieglojot gēnu rediģēšanu vai izslēgšanu. Šī elastība ļauj pētniekiem CHO-K1 saimnieka šūnās ieviest konkrētus gēnus, apklusināt gēnus vai pat veikt mērķtiecīgu gēnu rediģēšanu, izmantojot tādas tehnoloģijas kā CRISPR-Cas9.

Noslēgumā jāsecina, ka Ķīnas kāmja CHO-K1 šūnas un CHO šūnas ir izšķirošas biotehnoloģiskajos pētījumos un biofarmaceitisko preparātu ražošanā, piedāvājot daudzpusīgu platformu gēnu funkciju izpētei un liela apjoma rekombinantu proteīnu ražošanai.

Audums
Olnīcas
Pieteikumi
Šī šūnu līnija ir optimāla izvēle toksikoloģijai, rūpnieciskajai biotehnoloģijai un bioprodukcijai.
Sinonīmi
  • CHO K1
  • CHOK1
  • CHO cell clone K1
  • GM15452

02Klasifikācija

Organisms
Ķīniešu kāmītis
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atsperes
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Kariotips
Hromosomu biežuma sadalījums 50 šūnas: 2n = 22. Cilindru skaits ir hipodiploīds
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
22 stundas

04Identifikatori

Atsauce
Pielāgota CHO-K1 suspensija (Cytion kataloga numurs 603486)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10029
Cellosaurus
CVCL_0214

05Pazīmes un uzņēmība

Jutība pret vīrusiem
Vesikulārais stomatīts (Indiana), Getah vīruss Pret vīrusiem rezistenti: poliovīruss 2, modoc vīruss, Button Willow vīruss
Reversā transkriptāze
Negatīvs

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
CD CHO ThermoFisher, bez seruma, gatavs lietošanai.
Inkubācijas vide

37 °C, 5 % CO₂, mitrināta atmosfēra. Šūnas jākultivē uz orbitālās kratīšanas iekārtas, izmantojot Erlenmajera kratīšanas kolbas ar starpsienām, ar ātrumu 110 apgr./min.

Papildinājumi
L-glutamīns: pirms lietošanas pievienojiet, lai galīgā koncentrācija būtu 8 mM (parasti 40 ml uz litru 200 mM pamatšķīduma). Tas ir obligāti jāievēro, izmantojot CD CHO šūnas. Šūnu suspensijai pievienojiet pretagregācijas līdzekli attiecībā 1:100 un HT piedevu attiecībā 1:100.
Disociācijas reaģents
Neviens
Pārstādīšana
Viegli homogenizējiet šūnu suspensiju kolbā, pipetējot uz augšu un uz leju, pēc tam ņemiet reprezentatīvu paraugu, lai noteiktu šūnu blīvumu uz ml. Atšķaidiet suspensiju, lai sasniegtu šūnu koncentrāciju 1 x 105 šūnas/ml ar svaigu kultūras barotni, un sadaliet pielāgoto suspensiju jaunās kolbās turpmākai kultivēšanai.
Sēšanas blīvums
4 × 105 šūnas/ml
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
Pieaugušo