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CHO-K1 suspension adapted
Tecido
Ovário
Sinónimos
CHO K1, CHOK1, CHO cell clone K1, GM15452

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CHO-K1 suspension adapted

Cell line · Número do produto 603486

CHO-K1 cells are a subline derived from the CHO cell line, which was originally established in the early 1950s from a Chinese hamster ovary. CHO-K1 cells ...

€430.00sem impostos nem portes de envio

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01Informações gerais

Descrição

As células CHO-K1 são uma sub-linha derivada da linha de células CHO, que foi originalmente criada no início dos anos 50 a partir de um ovário de hamster chinês. As células CHO-K1 são amplamente utilizadas na produção de anticorpos monoclonais terapêuticos e outros produtos biofarmacêuticos. A sua utilização extensiva na produção de proteínas biofarmacêuticas e vacinas é atribuída à sua natureza eucariótica, que permite a dobragem, montagem e modificações pós-traducionais adequadas, como a glicosilação, que influencia a estabilidade, a eficácia e a segurança das proteínas produzidas.

No domínio da produção de proteínas recombinantes, a linha celular CHO-K1 é utilizada para expressar uma vasta gama de proteínas, incluindo anticorpos monoclonais, factores de crescimento, citocinas e enzimas. Estas proteínas têm aplicações em tratamentos terapêuticos, ensaios de diagnóstico e formulações de vacinas.

As células CHO-K1 apresentam uma taxa de crescimento robusta e são adaptáveis a várias condições de cultura, incluindo culturas em suspensão e aderentes, o que as torna muito valiosas para processos de bioprodução em grande escala. Possuem um elevado nível de estabilidade genética e são utilizadas para o desenvolvimento de linhas celulares estáveis, uma vez que são capazes de amplificar e expressar genes exógenos de forma eficiente, o que é fundamental para a produção de elevados rendimentos de proteínas recombinantes.

As células CHO-K1 de hamster chinês podem ser facilmente transfectadas com uma variedade de vectores para a expressão de genes, facilitando a edição ou eliminação de genes. Esta flexibilidade permite aos investigadores introduzir genes específicos, silenciar genes ou mesmo efetuar a edição de genes específicos utilizando tecnologias como a CRISPR-Cas9 em células hospedeiras CHO-K1.

Em conclusão, as células CHO-K1 de hamster chinês e as células CHO são fundamentais na investigação biotecnológica e na produção biofarmacêutica, oferecendo uma plataforma versátil para o estudo da função dos genes e a produção em grande escala de proteínas recombinantes.

Tecido
Ovário
Aplicações
Esta linha celular é uma óptima escolha para toxicologia, biotecnologia industrial e bioprodução.
Sinónimos
  • CHO K1
  • CHOK1
  • CHO cell clone K1
  • GM15452

02Classificação

Organismo
Hamster chinês
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Suspensão
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
De tipo epitelial
Cariótipo
Distribuição da frequência dos cromossomas em 50 células: 2n = 22. O número da linha-tronco é hipodiplóide
Tempo de duplicação
22 horas

04Identificadores

Referência
Suspensão CHO-K1 adaptada (número de catálogo da Cytion 603486)
Número de identificação fiscal do NCBI
10029
Cellosaurus
CVCL_0214

05Expressão e suscetibilidade

Susceptibilidade ao vírus
Estomatite vesicular (Indiana), vírus Getah Resistência a vírus: poliovírus 2, vírus modoc, vírus Button Willow
Transcriptase reversa
Negativo

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
CD CHO da ThermoFisher, sem soro e pronto a usar.
Atmosfera de incubação

37 °C, 5 % de CO₂, atmosfera humidificada. As células devem ser cultivadas num agitador orbital, em frascos de Erlenmeyer com defletores, a 110 rpm.

Suplementos
L-glutamina: adicionar até atingir uma concentração final de 8 mM (normalmente 40 mL por litro de uma solução-mãe a 200 mM) antes da utilização. Isto é obrigatório para as células CD CHO. Adicionar agente antiaglomerante na proporção de 1:100 e suplemento HT na proporção de 1:100 à suspensão celular.
Reagente de dissociação
Nenhum
Subcultura
Homogeneize suavemente a suspensão celular no frasco pipetando para cima e para baixo e, em seguida, recolha uma amostra representativa para determinar a densidade celular por ml. Dilua a suspensão para atingir uma concentração celular de 1 x 105 células/ml com meio de cultura fresco e alique a suspensão ajustada em novos frascos para cultivo adicional.
Densidade de sementeira
4 × 105 células/ml
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
Adulto