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CHO-K1 suspension adapted
Tissue
Ovario
Synonyms
CHO K1, CHOK1, CHO cell clone K1, GM15452

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CHO-K1 suspension adapted

Cell line · Product number 603486

CHO-K1 cells are a subline derived from the CHO cell line, which was originally established in the early 1950s from a Chinese hamster ovary. CHO-K1 cells ...

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Recommended (freshest lot)
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1

01General information

Description

Las células CHO-K1 son una sublínea derivada de la línea celular CHO, que se estableció originalmente a principios de la década de 1950 a partir de un ovario de hámster chino. Las células CHO-K1 se utilizan ampliamente en la producción de anticuerpos monoclonales terapéuticos y otros productos biofarmacéuticos. Su amplio uso en la producción de proteínas biofarmacéuticas y vacunas se atribuye a su naturaleza eucariótica, la cual permite el plegamiento, el ensamblaje y las modificaciones postraduccionales adecuadas, como la glicosilación, lo cual influye en la estabilidad, la eficacia y la seguridad de las proteínas producidas.

En el ámbito de la producción de proteínas recombinantes, la línea celular CHO-K1 se utiliza para expresar una amplia gama de proteínas, entre ellas anticuerpos monoclonales, factores de crecimiento, citoquinas y enzimas. Estas proteínas tienen aplicaciones en tratamientos terapéuticos, ensayos de diagnóstico y formulaciones de vacunas.

Las células CHO-K1 presentan una tasa de crecimiento robusta y se adaptan a diversas condiciones de cultivo, incluidos los cultivos en suspensión y los adherentes, lo que las hace muy valiosas para los procesos de bioproducción a gran escala. Poseen un alto nivel de estabilidad genética y se utilizan para el desarrollo de líneas celulares estables, ya que son capaces de amplificar y expresar genes exógenos de manera eficiente, lo cual es fundamental para producir altos rendimientos de proteínas recombinantes.

Las células CHO-K1 de hámster chino pueden transfectarse fácilmente con una variedad de vectores para la expresión génica, lo que facilita la edición o la silenciación de genes. Esta flexibilidad permite a los investigadores introducir genes específicos, silenciar genes o incluso realizar ediciones genéticas dirigidas utilizando tecnologías como CRISPR-Cas9 en las células huéspedes CHO-K1.

En conclusión, las células CHO-K1 de hámster chino y las células CHO son fundamentales en la investigación biotecnológica y la producción biofarmacéutica, ya que ofrecen una plataforma versátil para el estudio de la función génica y la producción a gran escala de proteínas recombinantes.

Tissue
Ovario
Applications
Esta línea celular es una opción óptima para la toxicología, la biotecnología industrial y la bioproducción.
Synonyms
  • CHO K1
  • CHOK1
  • CHO cell clone K1
  • GM15452

02Classification

Organism
Chinese hamster
Sex
Female
Growth properties
Suspension
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
De tipo epitelial
Karyotype
Distribución de frecuencias cromosómicas en 50 células: 2n = 22. El número de cromosomas de la línea madre es hipodiploide
Doubling time
22 horas

04Identifiers

Citation
Suspensión CHO-K1 adaptada (número de catálogo de Cytion 603486)
NCBI TaxID
10029
Cellosaurus
CVCL_0214

05Expression and susceptibility

Virus susceptibility
Estomatitis vesicular (Indiana), virus Getah. Resistencia viral: poliovirus 2, virus Modoc, virus Button Willow
Reverse transcriptase
Negativo

06Handling and culture

Culture medium
CD CHO de ThermoFisher, sin suero y listo para usar.
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada. Las células deben cultivarse en un agitador orbital, en matraces Erlenmeyer con deflectores, a 110 rpm.

Supplements
L-glutamina: agregar hasta alcanzar una concentración final de 8 mM (por lo general, 40 mL por litro de una solución madre de 200 mM) antes de su uso. Esto es obligatorio para las células CHO CD. Agregar agente antiaglomerante en una proporción de 1:100 y suplemento HT en una proporción de 1:100 a la suspensión celular.
Dissociation reagent
Ninguno
Subculturing
Homogeneice suavemente la suspensión celular en el matraz pipeteando de arriba hacia abajo; luego, tome una muestra representativa para determinar la densidad celular por ml. Diluya la suspensión con medio de cultivo fresco hasta alcanzar una concentración celular de 1 × 10⁵ células/ml, y divida la suspensión ajustada en alícuotas en matraces nuevos para continuar con el cultivo.
Seeding density
4 × 105 células/ml
Fluid renewal
De 2 a 3 veces por semana
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Freeze medium
Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo (que incluye FBS) + 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo de Cytion 800100), que incluye osmoprotectores y estabilizadores metabólicos optimizados para mejorar la recuperación y reducir el estrés inducido por la criopreservación.
Storage conditions

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Shipping conditions

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

08Donor

Donor age
Adulto