CHO-K1 suspension adapted
Cell line · Tuotenumero 603486
CHO-K1 cells are a subline derived from the CHO cell line, which was originally established in the early 1950s from a Chinese hamster ovary. CHO-K1 cells ...
Räätälöinti / Suositukset
- CHO-K1 suspension adaptedCell line€430.00
Suositeltava (tuorein erä)
01Yleistä tietoa
- Kuvaus
CHO-K1-solut ovat alalinja, joka on peräisin CHO-solulinjasta, joka on alun perin luotu 1950-luvun alussa kiinalaisen hamsterin munasarjasta. CHO-K1-soluja käytetään laajalti terapeuttisten monoklonaalisten vasta-aineiden ja muiden biolääkkeiden tuotannossa. Niiden laajamittainen käyttö biofarmaseuttisten proteiinien ja rokotteiden tuotannossa johtuu niiden eukaryoottisesta luonteesta, joka mahdollistaa niiden asianmukaisen taittumisen, kokoonpanon ja posttranslationaaliset modifikaatiot, kuten glykosylaation, jotka vaikuttavat tuotettujen proteiinien vakauteen, tehokkuuteen ja turvallisuuteen.
Rekombinanttiproteiinien tuotannossa CHO-K1-solulinjaa käytetään monenlaisten proteiinien, kuten monoklonaalisten vasta-aineiden, kasvutekijöiden, sytokiinien ja entsyymien ilmentämiseen. Näitä proteiineja käytetään terapeuttisissa hoidoissa, diagnostisissa testeissä ja rokotevalmisteissa.
CHO-K1-soluilla on voimakas kasvunopeus, ja ne soveltuvat erilaisiin viljelyolosuhteisiin, kuten suspensio- ja adheesioviljelmiin, mikä tekee niistä erittäin arvokkaita laajamittaisissa biotuotantoprosesseissa. Niillä on korkea geneettinen stabiilisuus, ja niitä käytetään vakaiden solulinjojen kehittämiseen, koska ne pystyvät monistamaan ja ilmentämään eksogeenisia geenejä tehokkaasti, mikä on ratkaisevan tärkeää rekombinanttiproteiinien suurten saantojen tuottamiseksi.
CHO-K1-kiinanhamsterisolut voidaan helposti transfektoida erilaisilla vektoreilla geeniekspressiota varten, mikä helpottaa geenieditointia tai knockdownia. Tämän joustavuuden ansiosta tutkijat voivat tuoda CHO-K1-isäntäsoluihin tiettyjä geenejä, hiljentää geenejä tai jopa suorittaa kohdennettua geenieditointia CRISPR-Cas9:n kaltaisilla tekniikoilla.
Yhteenvetona voidaan todeta, että kiinalaisen hamsterin CHO-K1-solut ja CHO-solut ovat keskeisiä bioteknologisessa tutkimuksessa ja biolääkkeiden tuotannossa, sillä ne tarjoavat monipuolisen alustan geenien toiminnan tutkimiseen ja rekombinanttiproteiinien laajamittaiseen tuotantoon.
- Kudos
- Munasarja
- Sovellukset
- Tämä solulinja on optimaalinen valinta toksikologiaan, teolliseen biotekniikkaan ja biotuotantoon.
- Synonyymit
- CHO K1
- CHOK1
- CHO cell clone K1
- GM15452
02Luokittelu
- Organismi
- kiinalainen hamsteri
- Sukupuoli
- Nainen
- Kasvuominaisuudet
- Jousitus
- Bioturvallisuustaso
- 1
03Ominaisuudet
- Morfologia
- Epiteelin kaltainen
- Karyotyyppi
- Kromosomien frekvenssijakauma 50 solua: 2n = 22. Kantasolumäärä on hypodiploidi
- Kaksinkertaistumisaika
- 22 tuntia
04Tunnisteet
- Lähdeviite
- Mukautettu CHO-K1-suspensio (Cytion-tuotenumero 603486)
- NCBI-verotunnus
- 10029
- Cellosaurus
- CVCL_0214
05Ilmentyminen ja alttius
- Viruksille altistuminen
- Vesicular stomatitis (Indiana), Getah-virus Virus Resistenssi: poliovirus 2, modoc-virus, Button Willow -virus
- Käänteiskopioijaentsyymi
- Negatiivinen
06Käsittely ja viljely
- Viljelyalusta
- CD CHO ThermoFisher, seerumiton, käyttövalmis.
- Inkubaatioilma
37 °C, 5 % CO₂, kostutettu ilmakehä. Soluja on viljeltävä orbitaalivärähtelijällä, jossa on väliseinillä varustetut Erlenmeyer-ravistelupullot, 110 rpm:n nopeudella.
- Ravintolisät
- L-glutamiini: lisää lopulliseksi pitoisuudeksi 8 mM (tyypillisesti 40 ml litraa kohti 200 mM:n kantaliuosta) ennen käyttöä. Tämä on pakollista CD CHO -solujen osalta. Lisää solususpensioon paakkuuntumisenestoainetta suhteessa 1:100 ja HT-lisäainetta suhteessa 1:100.
- Dissosiaatioreagenssi
- Ei mitään
- Soluviljely
- Homogenoi solususpensio varovasti pullossa pipetoimalla ylös ja alas, ota sitten edustava näyte solutiheyden määrittämiseksi millilitraa kohti. Laimenna suspensio tuoreella viljelyalustalla solupitoisuudeksi 1 x 105 solua/ml ja jaa säädetty suspensio uusiin pulloihin jatkokäsittelyä varten.
- Kylvötiheys
- 4 × 105 solua/ml
- Nesteen uusiminen
- 2-3 kertaa viikossa
- Sulatus ja viljely
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Laadunvalvonta ja kryosäilytys
- Hedelmättömyys
Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.
Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.
- Jäädytysaine
- Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
- Säilytysolosuhteet
Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.
- Toimitusehdot
Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.
08Lahjoittaja
- Luovuttajan ikä
- Aikuiset
09Oikeudelliset ja turvallisuusasiat
- Turvallisuusohjeet
- Kun suunnitellaan kryoputken säilyttämistä nestemäisessä typessä sulatusta varten, on noudatettava tiukkoja turvatoimenpiteitä. Asianmukaiset suojakäsineet ja -vaatteet ovat välttämättömiä, ja kasvonaamarin tai suojalasien käyttö on välttämätöntä siirrettäessä jäädytettyjä näytteitä nestetyppisäiliöön tai siitä pois. Tällä pyritään pienentämään loukkaantumisriskiä, joka aiheutuu kryoputkien mahdollisista räjähdyksistä, jotka voivat aiheuttaa terävien sirpaleiden sinkoutumisen.
- Vastuuvapauslauseke
- Solujamme tarjotaan yksinomaan in vitro -laboratoriotutkimustarkoituksiin, eikä niitä ole tarkoitettu kliiniseen tai diagnostiseen käyttöön, eikä niitä saa antaa ihmisille tai käyttää eläinlääkinnällisiin tarkoituksiin. Käyttäjien on noudatettava kaikkia sovellettavia ohjeita ja määräyksiä, jotka koskevat näiden solujen käsittelyä ja käyttöä tutkimusympäristössä.
- Takuu
Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia
Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa
- Aineiden siirtoa koskeva sopimus vaaditaan
- Kyllä
