Mine otse sisu juurde
CHO-K1 suspension adapted
Kude
Munasarjad
Sünonüümid
CHO K1, CHOK1, CHO cell clone K1, GM15452

Dokumendid

CHO-K1 suspension adapted

Cell line · Toote number 603486

CHO-K1 cells are a subline derived from the CHO cell line, which was originally established in the early 1950s from a Chinese hamster ovary. CHO-K1 cells ...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

CHO-K1 rakud on alamliin, mis on saadud CHO rakuliinist, mis loodi algselt 1950. aastate alguses Hiina hamstri munasarjast. CHO-K1 rakke kasutatakse laialdaselt terapeutiliste monoklonaalsete antikehade ja muude biofarmatseutiliste ravimite tootmisel. Nende laialdane kasutamine biofarmatseutiliste valkude ja vaktsiinide tootmisel on tingitud nende eukarüootilisest olemusest, mis võimaldab nõuetekohast voldimist, kokkupanekut ja posttranslatiivseid modifikatsioone, nagu glükosüülimine, mis mõjutab toodetud valkude stabiilsust, tõhusust ja ohutust.

Rekombinantsete valkude tootmisel kasutatakse CHO-K1 rakuliini paljude valkude, sealhulgas monoklonaalsete antikehade, kasvufaktorite, tsütokiinide ja ensüümide ekspressiooniks. Neid valke kasutatakse terapeutilistes ravimeetodites, diagnostilistes testides ja vaktsiinide koostises.

CHO-K1 rakud kasvavad jõudsalt ja on kohandatavad erinevate kultuuritingimustega, sealhulgas suspensiooni- ja adherentsete kultuuridega, mis muudab need väga väärtuslikuks suuremahuliste biotootmisprotsesside jaoks. Neil on suur geneetiline stabiilsus ja neid kasutatakse stabiilsete rakuliinide arendamiseks, kuna nad on võimelised tõhusalt amplifitseerima ja ekspresseerima eksogeenseid geene, mis on oluline rekombinantsete valkude suure saagise tootmiseks.

CHO-K1 Hiina hamstrirakke saab hõlpsasti transfekteerida mitmesuguste geeniekspressioonivektoritega, mis võimaldavad geenide redigeerimist või koputamist. Selline paindlikkus võimaldab teadlastel viia CHO-K1 peremeesrakkudes sisse spetsiifilisi geene, vaigistada geene või isegi teostada sihipärast geenitöötlust, kasutades selliseid tehnoloogiaid nagu CRISPR-Cas9.

Kokkuvõttes on Hiina hamstri CHO-K1 rakud ja CHO rakud biotehnoloogilistes uuringutes ja biofarmatseutiliste ravimite tootmises keskse tähtsusega, pakkudes mitmekülgset platvormi geenifunktsiooni uurimiseks ja rekombinantsete valkude laiaulatuslikuks tootmiseks.

Kude
Munasarjad
Rakendused
See rakuliin on optimaalne valik toksikoloogia, tööstusliku biotehnoloogia ja biotootmise jaoks.
Sünonüümid
  • CHO K1
  • CHOK1
  • CHO cell clone K1
  • GM15452

02Klassifikatsioon

Organism
Hiina hamster
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Vedrustus
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Karyotüüp
Kromosoomide sagedusjaotus 50 rakku: 2n = 22. Tüvirida number on hüpodiploidne
Kahekordistumisaeg
22 tundi

04Tunnused

Viide
Kohandatud CHO-K1 suspensioon (Cytion katalooginumber 603486)
NCBI maksukood
10029
Cellosaurus
CVCL_0214

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Viirusele vastuvõtlikkus
Vesikulaarstomatiit (Indiana), Getah viirus Viirus Resistentsus: polioviirus 2, modoc viirus, Button Willow viirus
Pöördtranskriptaas
Negatiivne

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
CD CHO ThermoFisher, seerumivaba, kasutusvalmis.
Inkubatsiooni keskkond

37 °C, 5 % CO₂, niisutatud keskkond. Rakke tuleb kasvatada orbitaalsel loksutajal, kasutades vaheseintega Erlenmeyeri loksutuskolbe, kiirusel 110 pööret minutis.

Toidulisandid
L-glutamiin: lisage enne kasutamist nii, et lõplik kontsentratsioon oleks 8 mM (tavaliselt 40 ml 200 mM lahuse liitri kohta). See on CD CHO puhul kohustuslik. Lisage rakususpensioonile klompimist takistavat ainet suhtes 1:100 ja HT-lisandit suhtes 1:100.
Dissotsiatsioonireaktiiv
Puudub
Kultuuri edasikasvatamine
Homogeniseerige kolvis olev rakususpensioon õrnalt pipeteerides üles-alla, seejärel võtke representatiivne proov, et määrata rakkude tihedus ml kohta. Lahjendage suspensiooni värske kultuurikeskkonnaga, et saavutada rakkude kontsentratsioon 1 x 105 rakku/ml, ja jaotage reguleeritud suspensioon uute kolvide vahel edasiseks kasvatamiseks.
Külvitihedus
4 × 10⁵ rakku/ml
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
Täiskasvanud