Langsung ke isi
CHO-K1 suspension adapted
Tisu
Ovarium
Sinonim
CHO K1, CHOK1, CHO cell clone K1, GM15452

CHO-K1 suspension adapted

Cell line · Nomor produk 603486

CHO-K1 cells are a subline derived from the CHO cell line, which was originally established in the early 1950s from a Chinese hamster ovary. CHO-K1 cells ...

€430.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim

Penyesuaian / Rekomendasi

Tersedia
Lot
Direkomendasikan (stok terbaru)
  • CoA
1

01Informasi umum

Deskripsi

Sel CHO-K1 adalah subgalur yang berasal dari garis sel CHO, yang pada awalnya dibuat pada awal tahun 1950-an dari ovarium hamster Cina. Sel CHO-K1 digunakan secara luas dalam produksi antibodi monoklonal terapeutik dan biofarmasi lainnya. Penggunaannya yang luas dalam produksi protein biofarmasi dan vaksin disebabkan oleh sifat eukariotiknya, yang memungkinkan pelipatan, perakitan, dan modifikasi pasca-translasi yang tepat seperti glikosilasi, yang memengaruhi stabilitas, kemanjuran, dan keamanan protein yang diproduksi.

Dalam bidang produksi protein rekombinan, garis sel CHO-K1 digunakan untuk mengekspresikan beragam protein, termasuk antibodi monoklonal, faktor pertumbuhan, sitokin, dan enzim. Protein-protein ini memiliki aplikasi dalam perawatan terapeutik, tes diagnostik, dan formulasi vaksin.

Sel CHO-K1 menunjukkan tingkat pertumbuhan yang kuat dan mudah beradaptasi dengan berbagai kondisi kultur, termasuk kultur suspensi dan kultur yang melekat, sehingga sangat berharga untuk proses bioproduksi skala besar. Sel ini memiliki tingkat stabilitas genetik yang tinggi dan digunakan untuk pengembangan lini sel yang stabil karena mampu mengamplifikasi dan mengekspresikan gen eksogen secara efisien, yang sangat penting untuk menghasilkan protein rekombinan dalam jumlah besar.

Sel hamster Cina CHO-K1 dapat dengan mudah ditransfeksi dengan berbagai vektor untuk ekspresi gen, memfasilitasi pengeditan gen atau knockdown. Fleksibilitas ini memungkinkan para peneliti untuk memperkenalkan gen tertentu, membungkam gen, atau bahkan melakukan pengeditan gen yang ditargetkan menggunakan teknologi seperti CRISPR-Cas9 dalam sel inang CHO-K1.

Kesimpulannya, sel CHO-K1 hamster Cina dan sel CHO sangat penting dalam penelitian bioteknologi dan produksi biofarmasi, menawarkan platform serbaguna untuk mempelajari fungsi gen dan produksi protein rekombinan dalam skala besar.

Tisu
Ovarium
Aplikasi
Lini sel ini merupakan pilihan optimal untuk toksikologi, bioteknologi industri, dan bioproduksi.
Sinonim
  • CHO K1
  • CHOK1
  • CHO cell clone K1
  • GM15452

02Klasifikasi

Organisme
Hamster Cina
Seks
Perempuan
Sifat-sifat pertumbuhan
Penangguhan
Tingkat keamanan hayati
1

03Karakteristik

Morfologi
Seperti epitel
Kariotipe
Distribusi Frekuensi Kromosom 50 Sel: 2n = 22. Nomor induk adalah hipodiploid
Waktu penggandaan
22 jam

04Pengidentifikasi

Referensi
Suspensi CHO-K1 yang telah disesuaikan (nomor katalog Cytion 603486)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
10029
Cellosaurus
CVCL_0214

05Ekspresi dan kerentanan

Kerentanan terhadap virus
Stomatitis vesikular (Indiana), virus Getah, Virus Tahan: virus polio 2, virus modoc, virus Button Willow
Transkriptase balik
Negatif

06Penanganan dan budidaya

Media kultur
CD CHO ThermoFisher, bebas serum dan siap pakai.
Suasana inkubasi

37°C, 5% CO₂, atmosfer yang dilembapkan. Sel harus dibudidayakan pada pengocok orbital dalam labu Erlenmeyer bergelombang dengan kecepatan 110 rpm.

Suplemen
L-glutamin: tambahkan hingga konsentrasi akhir 8 mM (biasanya 40 mL per liter larutan induk 200 mM) sebelum digunakan. Hal ini wajib dilakukan untuk sel CD CHO. Tambahkan agen anti-penggumpalan dengan perbandingan 1:100 dan suplemen HT dengan perbandingan 1:100 ke dalam suspensi sel.
Reagen disosiasi
Tidak ada
Perbanyakan sel
Homogenisasi secara perlahan suspensi sel dalam flask dengan cara menghisap dan mengeluarkan cairan menggunakan pipet, lalu ambil sampel representatif untuk menentukan kepadatan sel per ml.encerkan suspensi tersebut hingga mencapai konsentrasi sel 1 x 10⁵ sel/ml menggunakan medium kultur segar, dan bagi suspensi yang telah disesuaikan ke dalam flask baru untuk budidaya lebih lanjut.
Kepadatan penanaman
4 × 10⁵ sel/ml
Pergantian cairan
2 hingga 3 kali per minggu
Pencairan dan pembiakan
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

08Donatur

Usia donor
Dewasa