CHO-K1 suspension adapted

As células CHO-K1 são uma sublinha derivada da linhagem celular CHO, que foi originalmente estabelecida no início da década de 1950 a partir de um ovário de hamster chinês. As células CHO-K1 são amplamente utilizadas na produção de anticorpos monoclonais terapêuticos e outros produtos biofarmacêuticos. Seu amplo uso na produção de proteínas biofarmacêuticas e vacinas deve-se à sua natureza eucariótica, que permite o dobramento, a montagem e as modificações pós-traducionais adequadas, como a glicosilação, que influencia a estabilidade, a eficácia e a segurança das proteínas produzidas.

No âmbito da produção de proteínas recombinantes, a linhagem celular CHO-K1 é utilizada para expressar uma ampla variedade de proteínas, incluindo anticorpos monoclonais, fatores de crescimento, citocinas e enzimas. Essas proteínas têm aplicações em tratamentos terapêuticos, ensaios diagnósticos e formulações de vacinas.

As células CHO-K1 apresentam uma taxa de crescimento robusta e são adaptáveis a várias condições de cultura, incluindo culturas em suspensão e aderentes, o que as torna altamente valiosas para processos de bioprodução em larga escala. Elas possuem um alto nível de estabilidade genética e são utilizadas para o desenvolvimento de linhagens celulares estáveis, pois são capazes de amplificar e expressar genes exógenos de forma eficiente, o que é fundamental para a produção de altos rendimentos de proteínas recombinantes.

As células CHO-K1 de hamster chinês podem ser facilmente transfectadas com uma variedade de vetores para expressão gênica, facilitando a edição ou o silenciamento de genes. Essa flexibilidade permite que os pesquisadores introduzam genes específicos, silenciem genes ou até mesmo realizem edição gênica direcionada usando tecnologias como o CRISPR-Cas9 em células hospedeiras CHO-K1.

Em conclusão, as células CHO-K1 de hamster chinês e as células CHO são fundamentais na pesquisa biotecnológica e na produção biofarmacêutica, oferecendo uma plataforma versátil para o estudo da função gênica e a produção em larga escala de proteínas recombinantes.

37 °C, 5% _de CO_₂, atmosfera umidificada. As células devem ser cultivadas em um agitador orbital, em frascos de Erlenmeyer com defletores, a 110 rpm.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.