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CHO-K1 suspension adapted
Tissue
卵巢
Synonyms
CHO K1, CHOK1, CHO cell clone K1, GM15452

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CHO-K1 suspension adapted

Cell line · Product number 603486

CHO-K1 cells are a subline derived from the CHO cell line, which was originally established in the early 1950s from a Chinese hamster ovary. CHO-K1 cells ...

US$430.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

CHO-K1 細胞是源自 CHO 細胞系的亞系,該細胞系最初於 1950 年代初期由中國倉鼠卵巢建立。CHO-K1 細胞廣泛應用於治療性單克隆抗體及其他生物製劑的生產。 該細胞系在生物製劑蛋白質生產及疫苗製造中被廣泛應用,這歸因於其真核細胞的特性,此特性能確保蛋白質正確摺疊、組裝,並進行糖基化等翻譯後修飾,這些過程皆會影響所生產蛋白質的穩定性、療效及安全性。

在重組蛋白生產領域,CHO-K1 細胞系被用於表達多種蛋白質,包括單克隆抗體、生長因子、細胞因子及酶。這些蛋白質可應用於治療、診斷檢測及疫苗製劑。

CHO-K1 細胞具有強勁的生長速率,並能適應各種培養條件,包括懸浮培養和貼壁培養,使其在大規模生物生產過程中極具價值。 該細胞線具有高度的遺傳穩定性,並被用於開發穩定細胞系,因其能高效擴增及表達外源基因,這對於高產量生產重組蛋白至關重要。

中國倉鼠 CHO-K1 細胞可輕鬆轉染多種載體以進行基因表達,從而促進基因編輯或基因敲低。這種靈活性使研究人員能夠在 CHO-K1 宿主細胞中導入特定基因、沉默基因,甚至利用 CRISPR-Cas9 等技術進行靶向基因編輯。

總而言之,中國倉鼠 CHO-K1 細胞與 CHO 細胞在生物技術研究及生物製藥生產中扮演關鍵角色,為基因功能研究及重組蛋白的大規模生產提供了多功能的平台。

Tissue
卵巢
Applications
該細胞系是毒理學、工業生物技術及生物生產領域的最佳選擇。
Synonyms
  • CHO K1
  • CHOK1
  • CHO cell clone K1
  • GM15452

02Classification

Organism
Chinese hamster
Sex
Female
Growth properties
Suspension
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
上皮樣
Karyotype
50 個細胞的染色體頻率分佈:2n = 22。該系號為次二倍體
Doubling time
22 小時

04Identifiers

Citation
經調整的 CHO-K1 懸浮培養液(Cytion 型號 603486)
NCBI TaxID
10029
Cellosaurus
CVCL_0214

05Expression and susceptibility

Virus susceptibility
水疱性口炎(印第安納州),蓋塔病毒 抗病毒性:小兒麻痺病毒 2 型、莫多克病毒、鈕扣柳病毒
Reverse transcriptase
否

06Handling and culture

Culture medium
ThermoFisher 抗體稀釋液 (CD CHO),無血清配方,開瓶即用。
Incubation atmosphere

37°C,5% CO₂,加濕環境。細胞必須置於帶擋板的埃倫邁耶搖瓶中,以每分鐘 110 轉的速度在軌道搖床上記育。

Supplements
L-谷氨醯胺:使用前需將濃度調整至最終 8 mM(通常每公升 200 mM 母液需添加 40 毫升)。此步驟對於 CD CHO 細胞而言是必須的。請向細胞懸浮液中加入 1:100 比例的抗結塊劑及 1:100 比例的 HT 補充劑。
Dissociation reagent
無
Subculturing
透過移液管上下吸放,輕柔地將燒瓶中的細胞懸浮液均質化,然後取一份具代表性的樣本,以測定每毫升的細胞密度。使用新鮮培養基將懸浮液稀釋至細胞濃度為 1 × 10⁵ 個細胞/毫升,並將調整後的懸浮液分裝至新的燒瓶中,以供進一步培養。
Seeding density
4 × 10⁵ 個細胞/毫升
Fluid renewal
每週 2 至 3 次
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法,排除支原體污染的可能性。

為確保無細菌、真菌或酵母菌污染,每日均會對細胞培養物進行目視檢查。

Freeze medium
作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基(含 FBS)+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率,或使用 CM-1 (Cytion 型號 800100),該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑,可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
Storage conditions

若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。

Shipping conditions

冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。

08Donor

Donor age
成人