SUM149PT

La lignée cellulaire SUM149PT est issue d’un carcinome mammaire inflammatoire (CMI) humain, qui constitue un sous-type agressif de cancer du sein. Le CMI se caractérise par une progression rapide, des métastases précoces et un mauvais pronostic. Les cellules SUM149PT sont classées parmi les cancers du sein triple négatifs (CCSN), car elles n’expriment ni le récepteur des œstrogènes (ER), ni le récepteur de la progestérone (PR), ni le récepteur HER2, ce qui les rend insensibles aux thérapies ciblées courantes telles que les traitements endocriniens ou les inhibiteurs de HER2. Le traitement de ces cancers repose donc généralement sur la chimiothérapie cytotoxique, bien que ces cancers développent souvent une résistance au fil du temps.

Il est important de noter que les cellules SUM149PT possèdent une mutation BRCA1 de type 2288delT, entraînant une perte de fonction du gène BRCA1. Cette mutation est une délétion avec décalage du cadre de lecture qui provoque la terminaison prématurée de la protéine BRCA1, ce qui altère la réparation de l’ADN et favorise l’instabilité génomique, une caractéristique distinctive des cancers présentant une mutation du gène BRCA1. La perte de BRCA1 contribue à l’instabilité chromosomique accrue observée dans SUM149PT, qui présente de nombreuses aberrations chromosomiques. Outre la mutation, le locus BRCA1 est perdu dans SUM149PT, ce qui aggrave encore l’impact sur la stabilité génomique.

Étonnamment, les cellules SUM149PT présentent une sous-population de cellules cancéreuses de type souche CD44+/CD24-/Low, qui est enrichie en propriétés des cellules souches cancéreuses (CSC), telles qu’une invasion accrue, une tumorigénèse et une résistance à la chimiothérapie. Ces cellules de type souche sont également associées à une amplification des centrosomes et à une activité élevée de la cycline E/Cdk2. L’inhibition de la Cdk2 dans la lignée SUM149PT cible sélectivement cette sous-population de CSC, rétablissant une certaine sensibilité à la chimiothérapie, ce qui suggère que des stratégies thérapeutiques combinées ciblant la Cdk2 et la chimiothérapie conventionnelle pourraient s’avérer efficaces dans le traitement du cancer du sein inflammatoire (IBC) chimiorésistant.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.