
- Kudos
- Rinta
- Sairaus
- Rintojen tulehduksellinen karsinooma
- Synonyymit
- SUM-149PT, SUM 149PT, SUM149-PT, SUM149, SUM-149, SUM 149, 149 PT, 149PT, BrCL12
Asiakirjat
SUM149PT
Cell line · Tuotenumero 300609
The SUM149PT cell line is derived from a human inflammatory breast carcinoma (IBC), which represents an aggressive subtype of breast cancer. IBC is charac...
Räätälöinti / Suositukset
- SUM149PTCell line€650.00
01Yleistä tietoa
- Kuvaus
SUM149PT-solulinja on peräisin ihmisen tulehduksellisesta rintasyövästä (IBC), joka edustaa rintasyövän aggressiivista alatyyppiä. IBC:lle on ominaista nopea eteneminen, varhainen etäpesäkkeiden muodostuminen ja huono ennuste. SUM149PT-solut luokitellaan kolmoisnegatiiviseksi rintasyöväksi (TNBC), sillä niistä puuttuu estrogeenireseptorin (ER), progesteronireseptorin (PR) ja HER2-reseptorin ilmentyminen, minkä vuoksi ne eivät reagoi tavanomaisiin kohdennettuihin hoitoihin, kuten hormonihoitoihin tai HER2-estäjiin. Sen sijaan tällaisten syöpien hoitoon kuuluu yleensä sytotoksinen kemoterapia, vaikka näille syöville kehittyy usein ajan myötä resistenssi.
Merkittävää on, että SUM149PT-soluissa on 2288delT BRCA1-mutaatio, joka johtaa BRCA1:n toiminnan menetykseen. Tämä mutaatio on frame-shift-deleetio, joka johtaa BRCA1-proteiinin ennenaikaiseen päättymiseen, mikä heikentää DNA:n korjausta ja edistää genomista epävakautta, joka on BRCA1-mutaation omaavien syöpien tunnusmerkki. BRCA1:n menetys vaikuttaa osaltaan SUM149PT:ssä havaittuun lisääntyneeseen kromosomisen epävakauteen, jossa esiintyy lukuisia kromosomipoikkeavuuksia. Mutaation lisäksi BRCA1-lokus on kadonnut SUM149PT:ssä, mikä pahentaa vaikutusta genomistabiilisuuteen entisestään.
Yllättäen SUM149PT-soluissa esiintyy CD44+/CD24-/Low stem-like -syöpäsolujen osapopulaatiota, jossa on runsaasti syöpäkantasolun (CSC) ominaisuuksia, kuten lisääntynyt invaasio, kasvainten synty ja resistenssi kemoterapiaa vastaan. Näihin kantasolujen kaltaisiin soluihin liittyy myös sentrosomin monistuminen ja kohonnut sykliini E/Cdk2-aktiivisuus. Cdk2:n estäminen SUM149PT:ssä kohdistuu valikoivasti tähän CSC-alipopulaatioon ja palauttaa jonkin verran herkkyyttä kemoterapialle, mikä viittaa siihen, että yhdistetyt terapeuttiset strategiat, jotka kohdistuvat Cdk2:een ja tavanomaiseen kemoterapiaan, saattavat olla tehokkaita kemoresistenttien IBC-solujen hoidossa.
- Kudos
- Rinta
- Sairaus
- Rintojen tulehduksellinen karsinooma
- Synonyymit
- SUM-149PT
- SUM 149PT
- SUM149-PT
- SUM149
- SUM-149
- SUM 149
- 149 PT
- 149PT
- BrCL12
02Luokittelu
- Organismi
- Ihminen
- Sukupuoli
- Nainen
- Kasvuominaisuudet
- Kiinnittynyt
03Ominaisuudet
- Morfologia
- Epiteeli
04Tunnisteet
- Lähdeviite
- SUM149PT (Cytionin luettelonumero 300609)
- NCBI-verotunnus
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_3422
05Ilmentyminen ja alttius
- Proteiinin ilmentyminen
- P53-positiivinen
06Käsittely ja viljely
- Viljelyalusta
- Ham's F12, w: 1,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820600a)
- Inkubaatioilma
37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.
- Ravintolisät
- Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
- Dissosiaatioreagenssi
- Accutase
- Soluviljely
- Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
- Sulatus ja viljely
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Laadunvalvonta ja kryosäilytys
- Hedelmättömyys
Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.
Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.
- Jäädytysaine
- Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
- Säilytysolosuhteet
Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.
- Toimitusehdot
Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.
08Lahjoittaja
- Luovuttajan ikä
- 40 vuotta
09Oikeudelliset ja turvallisuusasiat
- Turvallisuusohjeet
- Kun suunnitellaan kryoputken säilyttämistä nestemäisessä typessä sulatusta varten, on noudatettava tiukkoja turvatoimenpiteitä. Asianmukaiset suojakäsineet ja -vaatteet ovat välttämättömiä, ja kasvonaamarin tai suojalasien käyttö on välttämätöntä siirrettäessä jäädytettyjä näytteitä nestetyppisäiliöön tai siitä pois. Tällä pyritään pienentämään loukkaantumisriskiä, joka aiheutuu kryoputkien mahdollisista räjähdyksistä, jotka voivat aiheuttaa terävien sirpaleiden sinkoutumisen.
- Takuu
Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia
Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa
- Aineiden siirtoa koskeva sopimus vaaditaan
- Kyllä