Mine otse sisu juurde
SUM149PT
Kude
Rind
Haigus
Rinna põletikuline kartsinoom
Sünonüümid
SUM-149PT, SUM 149PT, SUM149-PT, SUM149, SUM-149, SUM 149, 149 PT, 149PT, BrCL12

Dokumendid

SUM149PT

Cell line · Toote number 300609

The SUM149PT cell line is derived from a human inflammatory breast carcinoma (IBC), which represents an aggressive subtype of breast cancer. IBC is charac...

€650.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

SUM149PT rakuliin on saadud inimese põletikulisest rinnavähist (IBC), mis kujutab endast rinnavähi agressiivset alatüüpi. IBC-d iseloomustab kiire progresseerumine, varajane metastaaside teke ja halb prognoos. SUM149PT rakud liigitatakse kolmiknegatiivse rinnavähi (TNBC) hulka, millel puudub östrogeeni retseptori (ER), progesterooni retseptori (PR) ja HER2 retseptori ekspressioon, mistõttu nad ei reageeri tavalistele sihtotstarbelistele ravimeetoditele, nagu endokriinsed ravimid või HER2-inhibiitorid. Selle asemel hõlmab selliste vähivormide ravi tavaliselt tsütotoksilist kemoteraapiat, kuigi nende vähivormide puhul tekib aja jooksul sageli resistentsus.

Oluline on see, et SUM149PT rakkudel on 2288delT BRCA1 mutatsioon, mis põhjustab BRCA1 funktsiooni kadumist. See mutatsioon on raamnihke deleetsioon, mis põhjustab BRCA1 valgu enneaegset lõpetamist, kahjustades DNA parandamist ja soodustades genoomset ebastabiilsust, mis on BRCA1-mutatsiooniga vähkkasvajate tunnusjooneks. BRCA1 kaotus aitab kaasa SUM149PT-l täheldatud suurenenud kromosoomilise ebastabiilsuse tekkele, mis näitab arvukaid kromosoomiaberratsioone. Lisaks mutatsioonile on SUM149PT-s kadunud ka BRCA1-lookus, mis suurendab veelgi mõju genoomi stabiilsusele.

Üllatuslikult on SUM149PT rakkudel CD44+/CD24-/Low stem-like vähirakkude alampopulatsioon, mis on rikastatud vähi tüvirakkude (CSC) omadustega, nagu suurenenud invasiivsus, tuumorigeneesi ja resistentsus keemiaravile. Need tüvelised rakud on seotud ka tsentrosoomi amplifikatsiooni ja kõrgendatud tsükliin E/Cdk2 aktiivsusega. Cdk2 inhibeerimine SUM149PT-s on selektiivselt suunatud sellele CSC-alampopulatsioonile, taastades teatava tundlikkuse keemiaravi suhtes, mis viitab sellele, et kombineeritud ravistrateegiad, mis on suunatud Cdk2-le ja tavapärasele keemiaravile, võivad olla tõhusad keemiaresidentse IBC ravimisel.

Kude
Rind
Haigus
Rinna põletikuline kartsinoom
Sünonüümid
  • SUM-149PT
  • SUM 149PT
  • SUM149-PT
  • SUM149
  • SUM-149
  • SUM 149
  • 149 PT
  • 149PT
  • BrCL12

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija

03Omadused

Morfoloogia
Epiteel

04Tunnused

Viide
SUM149PT (Cytioni katalooginumber 300609)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_3422

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Valgu ekspressioon
P53 positiivne

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
Ham's F12, w: 1,0 mM stabiilne glutamiin, w: 1,0 mM naatriumpüruvaat, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820600a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
40 aastat