SUM149PT

Linia komórkowa SUM149PT pochodzi z ludzkiego zapalnego raka piersi (IBC), który reprezentuje agresywny podtyp raka piersi. IBC charakteryzuje się szybką progresją, wczesnymi przerzutami i złym rokowaniem. Komórki SUM149PT są klasyfikowane jako potrójnie ujemny rak piersi (TNBC), pozbawiony ekspresji receptora estrogenowego (ER), receptora progesteronowego (PR) i receptora HER2, co sprawia, że nie reagują one na powszechnie stosowane terapie celowane, takie jak leczenie hormonalne lub inhibitory HER2. Zamiast tego leczenie takich nowotworów zwykle obejmuje chemioterapię cytotoksyczną, chociaż nowotwory te często rozwijają oporność w czasie.

Co istotne, komórki SUM149PT posiadają mutację 2288delT BRCA1, prowadzącą do utraty funkcji BRCA1. Mutacja ta jest delecją z przesunięciem ramki, która powoduje przedwczesne zakończenie białka BRCA1, upośledzając naprawę DNA i promując niestabilność genomu, cechę charakterystyczną nowotworów zmutowanych BRCA1. Utrata BRCA1 przyczynia się do zwiększonej niestabilności chromosomalnej obserwowanej w SUM149PT, który wykazuje liczne aberracje chromosomalne. Oprócz mutacji, locus BRCA1 jest utracony w SUM149PT, co dodatkowo potęguje wpływ na stabilność genomu.

Co zaskakujące, komórki SUM149PT wykazują subpopulację komórek nowotworowych podobnych do macierzystych CD44+/CD24-/Low, która jest wzbogacona o właściwości nowotworowych komórek macierzystych (CSC), takie jak zwiększona inwazja, nowotworzenie i oporność na chemioterapię. Te komórki macierzyste są również związane z amplifikacją centrosomu i podwyższoną aktywnością cykliny E/Cdk2. Zahamowanie Cdk2 w SUM149PT selektywnie celuje w tę subpopulację CSC, przywracając pewną wrażliwość na chemioterapię, co sugeruje, że połączone strategie terapeutyczne ukierunkowane na Cdk2 i konwencjonalną chemioterapię mogą być skuteczne w leczeniu chemioopornego IBC.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym