Přejít na obsah
SUM149PT
Tkáň
Prsa
Nemoc
Zánětlivý karcinom prsu
Synonyma
SUM-149PT, SUM 149PT, SUM149-PT, SUM149, SUM-149, SUM 149, 149 PT, 149PT, BrCL12

Dokumenty

SUM149PT

Cell line · Číslo výrobku 300609

The SUM149PT cell line is derived from a human inflammatory breast carcinoma (IBC), which represents an aggressive subtype of breast cancer. IBC is charac...

€650.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie SUM149PT je odvozena od lidského zánětlivého karcinomu prsu (IBC), který představuje agresivní podtyp karcinomu prsu. IBC se vyznačuje rychlou progresí, časným metastazováním a špatnou prognózou. Buňky SUM149PT jsou klasifikovány jako triple-negativní karcinom prsu (TNBC) a postrádají expresi estrogenového receptoru (ER), progesteronového receptoru (PR) a receptoru HER2, takže nereagují na běžné cílené terapie, jako je endokrinní léčba nebo inhibitory HER2. Místo toho léčba těchto nádorů obvykle zahrnuje cytotoxickou chemoterapii, ačkoli u těchto nádorů se časem často vyvine rezistence.

Významné je, že buňky SUM149PT mají mutaci 2288delT BRCA1, která vede ke ztrátě funkce BRCA1. Tato mutace je delecí s posunem rámce, která vede k předčasnému ukončení proteinu BRCA1, což narušuje opravu DNA a podporuje genomickou nestabilitu, která je charakteristickým znakem rakoviny s mutací BRCA1. Ztráta BRCA1 přispívá ke zvýšené chromozomální nestabilitě pozorované u SUM149PT, který vykazuje četné chromozomální aberace. Kromě mutace je u SUM149PT ztracen lokus BRCA1, což dále zvyšuje dopad na genomovou stabilitu.

Překvapivě buňky SUM149PT vykazují subpopulaci nádorových buněk podobnou kmenovým buňkám CD44+/CD24-/Low, která je obohacena o vlastnosti nádorových kmenových buněk (CSC), jako je zvýšená invaze, tumorigeneze a odolnost vůči chemoterapii. Tyto kmenové buňky jsou také spojeny s amplifikací centrozomů a zvýšenou aktivitou cyklinu E/Cdk2. Inhibice Cdk2 u SUM149PT selektivně zasahuje tuto subpopulaci CSC a obnovuje určitou citlivost na chemoterapii, což naznačuje, že kombinované léčebné strategie zaměřené na Cdk2 a konvenční chemoterapii by mohly být účinné při léčbě chemorezistentní IBC.

Tkáň
Prsa
Nemoc
Zánětlivý karcinom prsu
Synonyma
  • SUM-149PT
  • SUM 149PT
  • SUM149-PT
  • SUM149
  • SUM-149
  • SUM 149
  • 149 PT
  • 149PT
  • BrCL12

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Přívrženec

03Charakteristika

Morfologie
Epitelové

04Identifikátory

Citace
SUM149PT (katalogové číslo Cytion 300609)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_3422

05Exprese a náchylnost

Exprese proteinů
P53 pozitivní

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
Ham's F12, w: 1,0 mM stabilní glutamin, w: 1,0 mM pyruvát sodný, w: 1,1 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820600a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
40 let