
- Audums
- Krūtis
- Slimība
- Krūts iekaisuma karcinoma
- Sinonīmi
- SUM-149PT, SUM 149PT, SUM149-PT, SUM149, SUM-149, SUM 149, 149 PT, 149PT, BrCL12
Dokumenti
SUM149PT
Cell line · Preces numurs 300609
The SUM149PT cell line is derived from a human inflammatory breast carcinoma (IBC), which represents an aggressive subtype of breast cancer. IBC is charac...
Pielāgošana / Ieteikumi
- SUM149PTCell line€650.00
01Vispārīga informācija
- Apraksts
SUM149PT šūnu līnija ir iegūta no cilvēka krūts iekaisuma karcinomas (IBC), kas ir agresīvs krūts vēža apakštips. IBC ir raksturīga strauja progresēšana, agrīnas metastāzes un slikta prognoze. SUM149PT šūnas tiek klasificētas kā trīskārši negatīvs krūts vēzis (TNBC), kam trūkst estrogēnu receptoru (ER), progesterona receptoru (PR) un HER2 receptoru ekspresijas, tāpēc tās nereaģē uz parasto mērķterapiju, piemēram, endokrīno ārstēšanu vai HER2 inhibitoriem. Tā vietā šāda vēža ārstēšanā parasti izmanto citotoksisku ķīmijterapiju, lai gan laika gaitā šiem audzējiem bieži vien attīstās rezistence.
SUM149PT šūnām ir 2288delT BRCA1 mutācija, kas izraisa BRCA1 funkcijas zudumu. Šī mutācija ir rāmja nobīde, kas izraisa priekšlaicīgu BRCA1 proteīna izbeigšanos, traucējot DNS atjaunošanu un veicinot genoma nestabilitāti, kas ir raksturīga ar BRCA1 mutāciju bojātu vēža veidu iezīme. BRCA1 zudums veicina pastiprinātu hromosomu nestabilitāti, kas novērota SUM149PT, kurā ir daudz hromosomu aberāciju. Papildus mutācijai SUM149PT ir zaudēts arī BRCA1 lokuss, kas vēl vairāk pastiprina ietekmi uz genoma stabilitāti.
Pārsteidzoši, ka SUM149PT šūnām piemīt CD44+/CD24-/Low cilmes šūnas līdzīga vēža šūnu subpopulācija, kas ir bagātināta ar vēža cilmes šūnas (CSC) īpašībām, piemēram, pastiprinātu invaziju, audzēju veidošanos un rezistenci pret ķīmijterapiju. Šīm cilmes tipa šūnām ir arī centrosomu amplifikācija un paaugstināta ciklīna E/Cdk2 aktivitāte. Cdk2 inhibīcija SUM149PT selektīvi iedarbojas uz šo CSC subpopulāciju, atjaunojot zināmu jutību pret ķīmijterapiju, kas liecina, ka kombinētās terapeitiskās stratēģijas, kas vērstas pret Cdk2 un parasto ķīmijterapiju, varētu būt efektīvas ķīmijrezistentas IBC ārstēšanā.
- Audums
- Krūtis
- Slimība
- Krūts iekaisuma karcinoma
- Sinonīmi
- SUM-149PT
- SUM 149PT
- SUM149-PT
- SUM149
- SUM-149
- SUM 149
- 149 PT
- 149PT
- BrCL12
02Klasifikācija
- Organisms
- Cilvēks
- Sekss
- Sieviete
- Augšanas īpašības
- Atbalstītājs
03Raksturlielumi
- Morfoloģija
- Epitēlija
04Identifikatori
- Atsauce
- SUM149PT (Cytion kataloga numurs 300609)
- NCBI nodokļu identifikācijas numurs
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_3422
05Pazīmes un uzņēmība
- Proteīnu ekspresija
- P53 pozitīvs
06Apstrāde un audzēšana
- Barotne
- Hama F12, w: 1,0 mM stabils glutamīns, w: 1,0 mM nātrija piruvāts, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820600a)
- Inkubācijas vide
37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.
- Papildinājumi
- Papildināt barotni ar 10% FBS
- Disociācijas reaģents
- Accutase
- Pārstādīšana
- Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
- Atkausēšana un kultivēšana
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija
- Sterilitāte
Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.
Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.
- Saldēšanas barotne
- Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
- Uzglabāšanas nosacījumi
Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.
- Piegādes nosacījumi
Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.
08Ziedotājs
- Donora vecums
- 40 gadi
09Juridiskie jautājumi un drošība
- Drošības pasākumi
- Plānojot uzglabāt kriokviālu šķidrā slāpeklī turpmākai atkausēšanai, obligāti jāievēro stingri drošības pasākumi. Ir nepieciešami piemēroti aizsargcimdi un apģērbs, un, pārvietojot sasaldētos paraugus uz šķidrā slāpekļa tvertni vai no tās, ir jālieto sejas maska vai aizsargbrilles. Tas jādara, lai mazinātu traumu risku, ko var radīt iespējamas kriokrioviālu eksplozijas, kas var izraisīt asu fragmentu izmešanu.
- Garantija
Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām
Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu
- Nepieciešams materiālu nodošanas līgums
- Jā