SUM149PT

SUM149PT-cellelinjen er avledet fra et humant inflammatorisk brystkarsinom (IBC), som representerer en aggressiv undertype av brystkreft. IBC kjennetegnes av rask progresjon, tidlig metastasering og dårlig prognose. SUM149PT-celler er klassifisert som trippelnegativ brystkreft (TNBC), som mangler uttrykk for østrogenreseptor (ER), progesteronreseptor (PR) og HER2-reseptor, noe som gjør at de ikke responderer på vanlige målrettede behandlinger som endokrin behandling eller HER2-hemmere. I stedet behandles slike kreftformer vanligvis med cellegift, selv om disse kreftformene ofte utvikler resistens over tid.

Det er viktig å merke seg at SUM149PT-cellene har en 2288delT BRCA1-mutasjon, noe som fører til tap av BRCA1-funksjon. Denne mutasjonen er en rammeskift-delesjon som resulterer i for tidlig terminering av BRCA1-proteinet, noe som svekker DNA-reparasjon og fremmer genomisk ustabilitet, et kjennetegn ved BRCA1-mutert kreft. Tapet av BRCA1 bidrar til den økte kromosomale ustabiliteten som er observert i SUM149PT, som viser en rekke kromosomavvik. I tillegg til mutasjonen er BRCA1-lokuset tapt i SUM149PT, noe som ytterligere forsterker innvirkningen på den genomiske stabiliteten.

Overraskende nok viser SUM149PT-celler en CD44+/CD24-/Low-stamcellelignende subpopulasjon av kreftceller, som er beriket med kreftstamcelleegenskaper (CSC) som økt invasjon, tumorigenese og resistens mot kjemoterapi. Disse stamcellelignende cellene er også assosiert med centrosomamplifikasjon og forhøyet syklin E/Cdk2-aktivitet. Hemming av Cdk2 i SUM149PT retter seg selektivt mot denne CSC-subpopulasjonen og gjenoppretter en viss følsomhet for kjemoterapi, noe som tyder på at kombinerte behandlingsstrategier rettet mot Cdk2 og konvensjonell kjemoterapi kan være effektive i behandlingen av kjemoresistent IBC.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring