SUM149PT

A linha celular SUM149PT é derivada de um carcinoma inflamatório da mama humano (IBC), que representa um subtipo agressivo de cancro da mama. O IBC caracteriza-se por uma progressão rápida, metástases precoces e um mau prognóstico. As células SUM149PT são classificadas como cancro da mama triplo-negativo (TNBC), não expressando o recetor de estrogénio (ER), o recetor de progesterona (PR) e o recetor HER2, o que faz com que não respondam a terapias direcionadas comuns, como tratamentos endócrinos ou inibidores HER2. Em vez disso, o tratamento para estes cancros envolve normalmente quimioterapia citotóxica, embora estes cancros desenvolvam frequentemente resistência ao longo do tempo.

É significativo o facto de as células SUM149PT possuírem uma mutação BRCA1 2288delT, que conduz a uma perda da função BRCA1. Esta mutação é uma deleção por deslocamento de quadro que resulta na terminação prematura da proteína BRCA1, prejudicando a reparação do ADN e promovendo a instabilidade genómica, uma caraterística distintiva dos cancros com mutações BRCA1. A perda de BRCA1 contribui para o aumento da instabilidade cromossómica observada no SUM149PT, que apresenta numerosas aberrações cromossómicas. Para além da mutação, o locus BRCA1 está perdido no SUM149PT, agravando ainda mais o impacto na estabilidade genómica.

Surpreendentemente, as células SUM149PT exibem uma subpopulação de células cancerígenas CD44+/CD24-/Low semelhantes a células estaminais, que é enriquecida em propriedades de células estaminais cancerígenas (CSC), tais como maior invasão, tumorigénese e resistência à quimioterapia. Estas células estaminais estão também associadas à amplificação dos centrossomas e a uma atividade elevada da ciclina E/Cdk2. A inibição de Cdk2 em SUM149PT visa seletivamente esta subpopulação de CSC, restaurando alguma sensibilidade à quimioterapia, o que sugere que estratégias terapêuticas combinadas visando Cdk2 e quimioterapia convencional poderão ser eficazes no tratamento de IBC quimiorresistente.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia