
- Tissue
- שד
- Disease
- קרצינומה דלקתית של השד
- Synonyms
- SUM-149PT, SUM 149PT, SUM149-PT, SUM149, SUM-149, SUM 149, 149 PT, 149PT, BrCL12
Documents
01General information
- Description
קו התאים SUM149PT נגזר מקרצינומה דלקתית של השד (IBC) בבני אדם, המהווה תת-סוג אגרסיבי של סרטן השד. IBC מאופיין בהתקדמות מהירה, גרורות מוקדמות ופרוגנוזה גרועה. תאי SUM149PT מסווגים כסרטן שד שלילי משולש (TNBC), ללא ביטוי של קולטן אסטרוגן (ER), קולטן פרוגסטרון (PR) וקולטן HER2, מה שהופך אותם ללא מגיבים לטיפולים ממוקדים נפוצים כמו טיפולים אנדוקריניים או מעכבי HER2. במקום זאת, הטיפול בסרטן מסוג זה כולל בדרך כלל כימותרפיה ציטוטוקסית, אם כי סוגי סרטן אלה מפתחים לעתים קרובות עמידות לאורך זמן.
חשוב לציין שתאי SUM149PT נושאים מוטציה 2288delT BRCA1, המובילה לאובדן תפקוד BRCA1. מוטציה זו היא מחיקה של שינוי מסגרת הגורמת לסיום מוקדם של חלבון BRCA1, פוגעת בתיקון ה-DNA ומקדמת חוסר יציבות גנומית, סימן היכר של סוגי סרטן עם מוטציה BRCA1. אובדן BRCA1 תורם לחוסר היציבות הכרומוזומלית המוגברת הנצפית ב-SUM149PT, המציג מספר רב של חריגות כרומוזומליות. בנוסף למוטציה, לוקוס BRCA1 אובד ב-SUM149PT, מה שמחמיר עוד יותר את ההשפעה על היציבות הגנומית.
באופן מפתיע, תאי SUM149PT מציגים תת-אוכלוסייה של תאי סרטן דמויי גזע CD44+/CD24-/Low, העשירה בתכונות של תאי גזע סרטניים (CSC) כגון פלישה מוגברת, התפתחות גידולים ועמידות לכימותרפיה. תאים דמויי גזע אלה קשורים גם להגברת הצנטרוזום ולפעילות מוגברת של cyclin E/Cdk2. עיכוב Cdk2 ב-SUM149PT מכוון באופן סלקטיבי לתת-אוכלוסייה זו של CSC, ומשחזר חלק מהרגישות לכימותרפיה, מה שמרמז כי אסטרטגיות טיפול משולבות המכוונות ל-Cdk2 וכימותרפיה קונבנציונלית עשויות להיות יעילות בטיפול ב-IBC עמיד לכימותרפיה.
- Tissue
- שד
- Disease
- קרצינומה דלקתית של השד
- Synonyms
- SUM-149PT
- SUM 149PT
- SUM149-PT
- SUM149
- SUM-149
- SUM 149
- 149 PT
- 149PT
- BrCL12
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
03Characteristics
- Morphology
- אפיתל
04Identifiers
- Citation
- SUM149PT (מספר קטלוגי Cytion 300609)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_3422
05Expression and susceptibility
- Protein expression
- P53 חיובי
06Handling and culture
- Culture medium
- Ham's F12, w: 1.0 mM גלוטמין יציב, w: 1.0 mM נתרן פירובט, w: 1.1 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי Cytion 820600a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתווך 10% FBS
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Donor age
- 40 שנים
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes