Μετάβαση στο περιεχόμενο
SUM149PT
Ιστός
Στήθος
Ασθένεια
Φλεγμονώδες καρκίνωμα του μαστού
Συνώνυμα
SUM-149PT, SUM 149PT, SUM149-PT, SUM149, SUM-149, SUM 149, 149 PT, 149PT, BrCL12

Έγγραφα

SUM149PT

Cell line · Αριθμός προϊόντος 300609

The SUM149PT cell line is derived from a human inflammatory breast carcinoma (IBC), which represents an aggressive subtype of breast cancer. IBC is charac...

€650.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής
Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Η κυτταρική σειρά SUM149PT προέρχεται από ανθρώπινο φλεγμονώδες καρκίνωμα του μαστού (IBC), το οποίο αντιπροσωπεύει έναν επιθετικό υποτύπο καρκίνου του μαστού. Το IBC χαρακτηρίζεται από ταχεία εξέλιξη, πρώιμη μετάσταση και κακή πρόγνωση. Τα κύτταρα SUM149PT ταξινομούνται ως τριπλά αρνητικός καρκίνος του μαστού (TNBC), καθώς στερούνται έκφρασης του υποδοχέα οιστρογόνων (ER), του υποδοχέα προγεστερόνης (PR) και του υποδοχέα HER2, γεγονός που τα καθιστά μη ανταποκρινόμενα στις συνήθεις στοχευμένες θεραπείες, όπως οι ενδοκρινικές θεραπείες ή οι αναστολείς του HER2. Αντ' αυτού, η θεραπεία για τέτοιους καρκίνους περιλαμβάνει συνήθως κυτταροτοξική χημειοθεραπεία, αν και αυτοί οι καρκίνοι συχνά αναπτύσσουν αντίσταση με την πάροδο του χρόνου.

Είναι σημαντικό ότι τα κύτταρα SUM149PT διαθέτουν μετάλλαξη 2288delT BRCA1, που οδηγεί σε απώλεια της λειτουργίας του BRCA1. Αυτή η μετάλλαξη είναι μια διαγραφή με μετατόπιση πλαισίου που οδηγεί σε πρόωρο τερματισμό της πρωτεΐνης BRCA1, επηρεάζοντας την επιδιόρθωση του DNA και προωθώντας τη γονιδιωματική αστάθεια, χαρακτηριστικό γνώρισμα των καρκίνων με μετάλλαξη BRCA1. Η απώλεια του BRCA1 συμβάλλει στην αυξημένη χρωμοσωμική αστάθεια που παρατηρείται στο SUM149PT, το οποίο εμφανίζει πολυάριθμες χρωμοσωμικές ανωμαλίες. Εκτός από τη μετάλλαξη, ο τόπος BRCA1 χάνεται στον SUM149PT, επιδεινώνοντας περαιτέρω τον αντίκτυπο στη γονιδιωματική σταθερότητα.

Παραδόξως, τα κύτταρα SUM149PT εμφανίζουν έναν υποπληθυσμό καρκινικών κυττάρων που μοιάζουν με βλαστικά κύτταρα CD44+/CD24-/Low, ο οποίος είναι εμπλουτισμένος σε ιδιότητες καρκινικών βλαστικών κυττάρων (CSC), όπως η αυξημένη διείσδυση, η καρκινογένεση και η αντίσταση στη χημειοθεραπεία. Αυτά τα stem-like κύτταρα σχετίζονται επίσης με ενίσχυση του κεντροσώματος και αυξημένη δραστηριότητα της κυκλίνης E/Cdk2. Η αναστολή της Cdk2 στο SUM149PT στοχεύει επιλεκτικά αυτόν τον υποπληθυσμό CSC, αποκαθιστώντας κάποια ευαισθησία στη χημειοθεραπεία, γεγονός που υποδηλώνει ότι οι συνδυασμένες θεραπευτικές στρατηγικές που στοχεύουν την Cdk2 και τη συμβατική χημειοθεραπεία μπορεί να είναι αποτελεσματικές στη θεραπεία της χημειοανθεκτικής IBC.

Ιστός
Στήθος
Ασθένεια
Φλεγμονώδες καρκίνωμα του μαστού
Συνώνυμα
  • SUM-149PT
  • SUM 149PT
  • SUM149-PT
  • SUM149
  • SUM-149
  • SUM 149
  • 149 PT
  • 149PT
  • BrCL12

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Άνθρωπος
Σεξ
Γυναίκα
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Επιθηλιακό

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
SUM149PT (αριθμός καταλόγου Cytion 300609)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9606
Κελλοσαύρος
CVCL_3422

05Έκφραση και ευαισθησία

Έκφραση πρωτεϊνών
P53 θετικό

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
Ham's F12, w: 1,0 mM σταθερή γλουταμίνη, w: 1,0 mM πυρουβικό νάτριο, w: 1,1 g/L NaHCO3 (αριθμός άρθρου Cytion 820600a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Ηλικία δωρητή
40 χρόνια