SUM149PT

La linea cellulare SUM149PT deriva da un carcinoma mammario infiammatorio (IBC) umano, che rappresenta un sottotipo aggressivo di cancro al seno. L'IBC è caratterizzato da una rapida progressione, metastasi precoci e prognosi infausta. Le cellule SUM149PT sono classificate come tumori al seno triplo-negativi (TNBC), privi dell'espressione del recettore degli estrogeni (ER), del recettore del progesterone (PR) e del recettore HER2, il che le rende non responsive alle comuni terapie mirate come i trattamenti endocrini o gli inibitori di HER2. Il trattamento di questi tumori prevede invece tipicamente la chemioterapia citotossica, anche se spesso questi tumori sviluppano una resistenza nel tempo.

È significativo che le cellule SUM149PT possiedano una mutazione BRCA1 2288delT, che porta alla perdita della funzione di BRCA1. Questa mutazione è una delezione frame-shift che provoca la terminazione prematura della proteina BRCA1, compromettendo la riparazione del DNA e promuovendo l'instabilità genomica, un tratto distintivo dei tumori mutati in BRCA1. La perdita di BRCA1 contribuisce alla maggiore instabilità cromosomica osservata in SUM149PT, che presenta numerose aberrazioni cromosomiche. Oltre alla mutazione, il locus BRCA1 è perso in SUM149PT, aggravando ulteriormente l'impatto sulla stabilità genomica.

Sorprendentemente, le cellule SUM149PT presentano una sottopopolazione di cellule tumorali CD44+/CD24-/Low di tipo staminale, arricchita di proprietà delle cellule staminali del cancro (CSC), come l'aumento dell'invasione, della tumorigenesi e della resistenza alla chemioterapia. Queste cellule simil-staminali sono anche associate all'amplificazione del centrosoma e a un'elevata attività della ciclina E/Cdk2. L'inibizione di Cdk2 in SUM149PT colpisce selettivamente questa sottopopolazione di CSC, ripristinando una certa sensibilità alla chemioterapia, il che suggerisce che strategie terapeutiche combinate rivolte a Cdk2 e alla chemioterapia convenzionale potrebbero essere efficaci nel trattamento dell'IBC chemioresistente.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia