SUM149PT

A linhagem celular SUM149PT é derivada de um carcinoma de mama inflamatório (IBC) humano, que representa um subtipo agressivo de câncer de mama. O IBC é caracterizado por rápida progressão, metástase precoce e mau prognóstico. As células SUM149PT são classificadas como câncer de mama triplo-negativo (TNBC), sem expressão do receptor de estrogênio (ER), do receptor de progesterona (PR) e do receptor HER2, o que as torna insensíveis às terapias direcionadas comuns, como tratamentos endócrinos ou inibidores de HER2. Em vez disso, o tratamento para esses tipos de câncer geralmente envolve quimioterapia citotóxica, embora esses cânceres frequentemente desenvolvam resistência ao longo do tempo.

É importante ressaltar que as células SUM149PT possuem uma mutação 2288delT no BRCA1, levando à perda da função do BRCA1. Essa mutação é uma deleção com deslocamento de quadro de leitura que resulta na terminação prematura da proteína BRCA1, prejudicando o reparo do DNA e promovendo a instabilidade genômica, uma característica marcante dos cânceres com mutação no BRCA1. A perda do BRCA1 contribui para a maior instabilidade cromossômica observada no SUM149PT, que apresenta numerosas aberrações cromossômicas. Além da mutação, o locus do BRCA1 está ausente no SUM149PT, agravando ainda mais o impacto sobre a estabilidade genômica.

Surpreendentemente, as células SUM149PT exibem uma subpopulação de células cancerosas semelhantes a células-tronco do tipo CD44+/CD24-/Low, que é rica em propriedades de células-tronco cancerígenas (CSC), como aumento da invasão, tumorigênese e resistência à quimioterapia. Essas células semelhantes a células-tronco também estão associadas à amplificação de centrossomas e à atividade elevada da ciclina E/Cdk2. A inibição da Cdk2 na linha SUM149PT tem como alvo seletivo essa subpopulação de CSC, restaurando certa sensibilidade à quimioterapia, o que sugere que estratégias terapêuticas combinadas direcionadas à Cdk2 e à quimioterapia convencional podem ser eficazes no tratamento do IBC quimiorresistente.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.