Pereiti prie turinio
SUM149PT
Audinys
Krūtys
Liga
Krūties uždegiminė karcinoma
Sinonimai
SUM-149PT, SUM 149PT, SUM149-PT, SUM149, SUM-149, SUM 149, 149 PT, 149PT, BrCL12

Dokumentai

SUM149PT

Cell line · Prekės numeris 300609

The SUM149PT cell line is derived from a human inflammatory breast carcinoma (IBC), which represents an aggressive subtype of breast cancer. IBC is charac...

€650.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

SUM149PT ląstelių linija išvesta iš žmogaus uždegiminės krūties karcinomos (IBC), kuri yra agresyvus krūties vėžio potipis. IBC būdingas greitas progresavimas, ankstyvas metastazavimas ir bloga prognozė. SUM149PT ląstelės priskiriamos trigubai neigiamam krūties vėžiui (TNBC), neturinčiam estrogenų receptorių (ER), progesterono receptorių (PR) ir HER2 receptorių, todėl jos nereaguoja į įprastą tikslinę terapiją, pavyzdžiui, endokrininį gydymą ar HER2 inhibitorius. Vietoj to, tokio vėžio gydymas paprastai apima citotoksinę chemoterapiją, nors laikui bėgant šis vėžys dažnai įgyja atsparumą.

Svarbu tai, kad SUM149PT ląstelės turi 2288delT BRCA1 mutaciją, dėl kurios prarandama BRCA1 funkcija. Ši mutacija yra karkaso poslinkio delecija, dėl kurios BRCA1 baltymas per anksti nutrūksta, todėl sutrinka DNR taisymas ir skatinamas genomo nestabilumas, būdingas BRCA1 mutavusiems vėžiniams susirgimams. BRCA1 praradimas lemia padidėjusį chromosomų nestabilumą, pastebėtą SUM149PT, kurioje pastebima daug chromosomų aberacijų. Be mutacijos, SUM149PT yra prarastas BRCA1 lokusas, o tai dar labiau padidina genomo stabilumą.

Stebina tai, kad SUM149PT ląstelės pasižymi CD44+/CD24-/Low kamieninių vėžio ląstelių subpopuliacija, kuri pasižymi tokiomis savybėmis kaip padidėjusi invazija, navikinė liga ir atsparumas chemoterapijai. Šios į kamienines panašios ląstelės taip pat yra susijusios su centrosomų amplifikacija ir padidėjusiu ciklino E/Cdk2 aktyvumu. Cdk2 slopinimas SUM149PT selektyviai veikia šią CSC subpopuliaciją ir atkuria tam tikrą jautrumą chemoterapijai, o tai rodo, kad kombinuotos terapinės strategijos, nukreiptos prieš Cdk2 ir įprastinę chemoterapiją, gali būti veiksmingos gydant chemorezistentišką IBC.

Audinys
Krūtys
Liga
Krūties uždegiminė karcinoma
Sinonimai
  • SUM-149PT
  • SUM 149PT
  • SUM149-PT
  • SUM149
  • SUM-149
  • SUM 149
  • 149 PT
  • 149PT
  • BrCL12

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Moteris
Augimo savybės
Prisijungęs

03Charakteristikos

Morfologija
Epitelis

04Identifikatoriai

Nuoroda
SUM149PT (Cytion katalogo numeris 300609)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_3422

05Išraiška ir jautrumas

Baltojų baltymų ekspresija
P53 teigiamas

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
Ham's F12, w: 1,0 mM stabilus glutaminas, w: 1,0 mM natrio piruvatas, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820600a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
40 metų