Skip to content
CHO-UPAR
Tissue
שחלה
Disease
שחלה של אוגר סיני, שאינה ממאירה; מהונדסת גנטית לביטוי שטח של uPAR (PLAUR/CD87)

Documents

CHO-UPAR

Cell line · Product number 305978

Disclaimer: The prices displayed for cell lines are exclusively for academic/not-for-profit customers. For commercial entitites the pr...

US$1,900.00excl. tax and shipping
Made to order
1

01General information

Description

הצהרת הבהרה: המחירים המוצגים עבור קווי התאים מיועדים אך ורק ללקוחות אקדמיים או ללא כוונת רווח. עבור גופים מסחריים, המחיר הוא כ-6,250 אירו.
אם אתם מייצגים גוף מסחרי או שאינכם בטוחים לאיזו קטגוריה אתם משתייכים, אנא צרו איתנו קשר.


תאי CHO-uPAR הם תאי שחלה של אוגר סיני (CHO) מהונדסים, שנועדו לבטא באופן יציב את הקולטן האנושי למפעיל פלסמינוגן מסוג אורוקינאז (uPAR; PLAUR/CD87), קולטן על פני התא המוצמד לגליקוזילפוספטידילינוזיטול (GPI) המעורב בשינוי מבנה המטריקס החוץ-תאי, בהידבקות תאים, בנדידה ובפלישה לרקמות. uPAR נקשר למפעיל הפלסמינוגן של האורוקינאז (uPA), מקדם המרה מקומית של פלסמינוגן לפלסמין ובכך מסייע לפירוק פרוטאוליטי של רכיבי המטריצה החוץ-תאית. ביטוי מוגבר של uPAR קשור להתנהגות אגרסיבית של הגידול, גרורות, אנגיוגנזה ופרוגנוזה קלינית גרועה בסוגים רבים של סרטן, כולל סרטן השד, המעי הגס, הלבלב והריאות.

תאי CHO-uPAR נמצאים בשימוש נרחב בביולוגיה של הסרטן, בגילוי תרופות ובפיתוח טיפולים ממוקדים לאפיון נוגדנים, פפטידים, מולקולות קטנות, רדיוליגנדים וטיפולים בתאי חיסון מהונדסים המכוונים ל-uPAR. מערכת הביטוי הרקומביננטית היציבה תומכת בניתוח כמותי של קישור ליגנד, תפוסת קולטנים, קינטיקה של אינטראקציה בין uPA ל-uPAR, פנימיזציה של קולטנים ואירועי איתות במורד הזרם הקשורים למסלולי נדידה וחדירה. תאים אלה שימושיים גם להערכת חומרי הדמיה, מערכות טיפוליות המופעלות על ידי פרוטאז ואסטרטגיות נגד גרורות. בתהליכי פיתוח בדיקות, תאי CHO-uPAR משמשים בדרך כלל בציטומטריית זרימה, בדיקות הדבקה תאית, סינון בתפוקה גבוהה ומחקרי ציטוטוקסיות ספציפיים לקולטנים.

Tissue
שחלה
Disease
שחלה של אוגר סיני, שאינה ממאירה; מהונדסת גנטית לביטוי שטח של uPAR (PLAUR/CD87)
Applications
בדיקת נוגדנים; פיתוח טיפול המכוון ל-uPAR; מחקר בנושא פלישת סרטן/גרורות; טיפול ברדיוליגנד; ציטומטריית זרימה

02Classification

Organism
Chinese hamster
Sex
Female
Growth properties
Adherent and suspension
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This CHO cell line contains a PLAUR/uPAR expression cassette supporting receptor-function analyses. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי אפיתל
Cell type
תאי אפיתל
Doubling time
כ-14–16 שעות

04Identifiers

Citation
CHO-UPAR (מספר קטלוגי של Cytion: 305978)
NCBI TaxID
10029
Cellosaurus
CVCL_A8X4

05Expression and susceptibility

Surface antigens
uPAR (PLAUR/CD87)
Receptors expressed
TACD2 (TROP2 או GA733-1)

06Handling and culture

Culture medium

לתרבויות דבקות: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L גלוקוז, w: 2.5 mM L-גלוטמין, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM נתרן פירובט, w: 1.2 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי Cytion 820400a)

לתרבויות בתמיסה: CHO Growth Medium A (מ-InSCREENeX; מספר קטלוגי InSCREENeX INS-ME-1039)

Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
לתרבויות דבקות: הוסף לתמיסה 5% FBS. הוסף Geneticin (G418-Sulfat) כדי להגיע לריכוז סופי של 0.5 מ"ג/מ"ל.
Dissociation reagent
לתרבויות דבקות: טריפסין-EDTA
Subculturing
לגידול תאים נצמדים שגרתי: שאבו את המדיום הישן מהתאים הנצמדים ושטפו אותם ב-PBS כדי להסיר את כל שאריות המדיום. לאחר שאיבת ה-PBS, הוסף את הנפח המתאים של תמיסת טריפסין/EDTA בהתאם לגודל כלי התרבית (לדוגמה, 1 מ"ל עבור בקבוק T25, 3 מ"ל עבור בקבוק T75) והדגיר בטמפרטורת החדר או ב-37°C למשך 5-10 דקות, או עד שהתאים יתנתקו. עקבו אחר ההתנתקות תחת מיקרוסקופ, ובמידת הצורך טפחו קלות על הכלי כדי לשחרר את התאים. לאחר ההתנתקות, הוסיפו מצע מלא כדי להשבית את הטריפסין/EDTA, ערבבו קלות את התאים והעבירו חלק מהתאים המושהים לכלי תרבית חדש המכיל מצע טרי. הכניסו את הכלי לאינקובטור המכוון ל-37°C עם 5%CO2, והחליפו את המצע כל 2-3 ימים.
Split ratio
1 עד 5
Seeding density
2 עד 5 x 104 תאים/סמ"ר
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Post-thaw recovery

לאחר ההפשרה, חלק את התאים ביחס של 1:2 עד 1:3 בצלוחיות T25 והמתן לפחות 24 שעות עד שהתאים יתאוששו מתהליך ההקפאה וידבקו (בתרבויות דבקות).

Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
מבוגר