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CHO-UPAR
Tessuto
Ovaio
Malattia
Ovaio di criceto cinese, non neoplastico; geneticamente modificato per l'espressione di superficie dell'uPAR (PLAUR/CD87)

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CHO-UPAR

Cell line · Codice prodotto 305978

Avviso legale: I prezzi indicati per le linee cellulari sono riservati esclusivamente ai clienti del settore accademico o senza scopo di lucro. Per le entità commerciali, il prezzo...

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01Informazioni generali

Descrizione

Avviso: I prezzi indicati per le linee cellulari sono riservati esclusivamente a clienti del settore accademico o senza scopo di lucro. Per le entità commerciali il prezzo è di circa 6.250 €.
Se rappresenti un'entità commerciale o non sei sicuro di quale categoria ti riguardi, ti preghiamo di contattarci.


Le cellule CHO-uPAR sono cellule ricombinanti di ovaio di criceto cinese (CHO) ingegnerizzate per esprimere in modo stabile il recettore dell'attivatore del plasminogeno di tipo urochinasi umano (uPAR; PLAUR/CD87), un recettore di superficie cellulare ancorato al glicosilfosfatidilinositolo (GPI) coinvolto nel rimodellamento della matrice extracellulare, nell'adesione cellulare, nella migrazione e nell'invasione dei tessuti. L'uPAR si lega all'attivatore del plasminogeno di tipo urochinasi (uPA), promuovendo la conversione localizzata del plasminogeno in plasmina e facilitando così la degradazione proteolitica dei componenti della matrice extracellulare. Un'elevata espressione di uPAR è associata a un comportamento tumorale aggressivo, metastasi, angiogenesi e prognosi clinica sfavorevole in diversi tipi di tumore, tra cui quelli al seno, al colon-retto, al pancreas e al polmone.

Le cellule CHO-uPAR sono ampiamente utilizzate nella biologia del cancro, nella scoperta di farmaci e nello sviluppo di terapie mirate per la caratterizzazione di anticorpi, peptidi, piccole molecole, radioligandi e terapie con cellule immunitarie ingegnerizzate diretti contro l'uPAR. Il sistema di espressione ricombinante stabile supporta l'analisi quantitativa del legame del ligando, dell'occupazione del recettore, della cinetica di interazione uPA-uPAR, dell'internalizzazione del recettore e degli eventi di segnalazione a valle associati alle vie di migrazione e invasione. Queste cellule sono utili anche per la valutazione di agenti di imaging, sistemi terapeutici attivati da proteasi e strategie antimetastatiche. Nei flussi di lavoro di sviluppo dei test, le cellule CHO-uPAR sono comunemente applicate nella citometria a flusso, nei test di adesione cellulare, nello screening ad alta produttività e negli studi di citotossicità specifici per recettori.

Tessuto
Ovaio
Malattia
Ovaio di criceto cinese, non neoplastico; geneticamente modificato per l'espressione di superficie dell'uPAR (PLAUR/CD87)
Applicazioni
Screening degli anticorpi; sviluppo di terapie mirate all’uPAR; ricerca sull’invasione e la metastasi tumorale; terapia con radioligandi; citometria a flusso

02Classificazione

Organismo
Criceto cinese
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente e in sospensione
Presenza di OGM
GMO-S1
Dettagli sullo stato degli OGM
GMO-S1: This CHO cell line contains a PLAUR/uPAR expression cassette supporting receptor-function analyses. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio
Tipo di cellula
Cellule epiteliali
Tempo di raddoppio
circa 14-16 ore

04Identificatori

Riferimento bibliografico
CHO-UPAR (codice Cytion 305978)
Codice fiscale NCBI
10029
Cellosaurus
CVCL_A8X4

05Espressione e suscettibilità

Antigeni di superficie
uPAR (PLAUR/CD87)
Recettori espressi
TACD2 (TROP2 o GA733-1)

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura

Per colture aderenti: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L di glucosio, w: 2,5 mM di L-Glutammina, w: 15 mM di HEPES, w: 0,5 mM di Sodio piruvato, w: 1,2 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820400a)

Per colture in sospensione: CHO Growth Medium A (da InSCREENeX; numero di catalogo InSCREENeX INS-ME-1039)

Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Per colture aderenti: Integrare il terreno di coltura con il 5% di FBS. Aggiungere Geneticina (G418-Sulfat) per ottenere una concentrazione finale di 0,5 mg/mL.
Reagente di dissociazione
Per colture aderenti: Tripsina-EDTA
Subcoltura
Per la coltura di routine di cellule aderenti: Aspirare il vecchio terreno di coltura dalle cellule aderenti e lavarle con PBS per rimuovere il terreno residuo. Dopo aver aspirato il PBS, aggiungere il volume appropriato di soluzione di tripsina/EDTA in base alle dimensioni del recipiente di coltura (ad esempio, 1 ml per una fiasca T25, 3 ml per una fiasca T75) e incubare a temperatura ambiente o a 37°C per 5-10 minuti, o fino al distacco delle cellule. Monitorare il distacco al microscopio e, se necessario, picchiettare delicatamente il contenitore per liberare le cellule. Una volta staccate, aggiungere terreno completo per inattivare la tripsina/EDTA, risospendere delicatamente le cellule e trasferire un'aliquota della sospensione cellulare in un nuovo recipiente di coltura contenente terreno fresco. Porre il recipiente in un incubatore a 37°C con il 5% diCO2 e cambiare il terreno ogni 2-3 giorni.
Rapporto di frazionamento
Da 1 a 5
Densità di semina
Da 2 a 5 x 104 cellule/cm2
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Recupero post-scongelamento

Dopo lo scongelamento, dividere le cellule in un rapporto da 1:2 a 1:3 in fiasche T25 e lasciare che le cellule si riprendano dal processo di congelamento e aderiscano (per le colture aderenti) per almeno 24 ore.

Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
Adulti