Μετάβαση στο περιεχόμενο
CHO-UPAR
Ιστός
Ωοθήκη
Ασθένεια
Ωοθήκη κινέζικου χάμστερ, μη νεοπλασματική· γενετικά τροποποιημένη για επιφανειακή έκφραση του uPAR (PLAUR/CD87)

Έγγραφα

CHO-UPAR

Cell line · Αριθμός προϊόντος 305978

Δήλωση αποποίησης ευθύνης: Οι τιμές που εμφανίζονται για τις κυτταρικές σειρές αφορούν αποκλειστικά πελάτες του ακαδημαϊκού τομέα ή μη κερδοσκοπικού χαρακτήρα. Για εμπορικές οντότητες, οι τιμές...

€1,900.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής
Κατασκευάζεται κατόπιν παραγγελίας
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Σημείωση: Οι τιμές που εμφανίζονται για τις κυτταρικές σειρές ισχύουν αποκλειστικά για πελάτες του ακαδημαϊκού τομέα ή μη κερδοσκοπικού χαρακτήρα. Για εμπορικές επιχειρήσεις, η τιμή ανέρχεται σε περίπου 6.250 €.
Εάν εκπροσωπείτε εμπορική επιχείρηση ή δεν είστε σίγουροι για την κατηγορία στην οποία ανήκετε, παρακαλούμε επικοινωνήστε μαζί μας.


Τα κύτταρα CHO-uPAR είναι ανασυνδυασμένα κύτταρα ωοθηκών κινέζικου χάμστερ (CHO) που έχουν τροποποιηθεί γενετικά ώστε να εκφράζουν σταθερά τον ανθρώπινο υποδοχέα ενεργοποιητή πλασμινογόνου τύπου ουροκινάσης (uPAR; PLAUR/CD87), έναν υποδοχέα κυτταρικής επιφάνειας αγκυρωμένο σε γλυκοζυλοφωσφατιδυλοϊνοσιτόλη (GPI) που εμπλέκεται στην αναδιαμόρφωση της εξωκυτταρικής μήτρας, την κυτταρική προσκόλληση, τη μετανάστευση και την εισβολή στους ιστούς. Ο uPAR συνδέεται με τον ενεργοποιητή πλασμινογόνου τύπου ουροκινάσης (uPA), προωθώντας την τοπική μετατροπή του πλασμινογόνου σε πλασμίνη και διευκολύνοντας έτσι την πρωτεολυτική αποικοδόμηση των συστατικών της εξωκυτταρικής μήτρας. Η αυξημένη έκφραση του uPAR συνδέεται με επιθετική συμπεριφορά του όγκου, μετάσταση, αγγειογένεση και κακή κλινική πρόγνωση σε πολλούς τύπους καρκίνου, συμπεριλαμβανομένων των καρκίνων του μαστού, του παχέος εντέρου, του παγκρέατος και του πνεύμονα.

Τα κύτταρα CHO-uPAR χρησιμοποιούνται ευρέως στη βιολογία του καρκίνου, στην ανακάλυψη φαρμάκων και στην ανάπτυξη στοχευμένων θεραπειών για τον χαρακτηρισμό αντισωμάτων, πεπτιδίων, μικρών μορίων, ραδιοσυνδετών και θεραπειών με τροποποιημένα ανοσοκύτταρα που στοχεύουν τον uPAR. Το σταθερό σύστημα ανασυνδυασμένης έκφρασης υποστηρίζει την ποσοτική ανάλυση της σύνδεσης των συνδέτων, της κατάληψης των υποδοχέων, της κινητικής αλληλεπίδρασης uPA-uPAR, της εσωτερικοποίησης των υποδοχέων και των μεταγενέστερων σηματοδοτικών γεγονότων που σχετίζονται με τις οδούς μετανάστευσης και εισβολής. Αυτά τα κύτταρα είναι επίσης χρήσιμα για την αξιολόγηση παραγόντων απεικόνισης, θεραπευτικών συστημάτων που ενεργοποιούνται από πρωτεάση και στρατηγικών κατά των μεταστάσεων. Στις ροές εργασίας ανάπτυξης δοκιμασιών, τα κύτταρα CHO-uPAR εφαρμόζονται συνήθως στη ροοκυτταρομετρία, στις δοκιμασίες κυτταρικής προσκόλλησης, στον έλεγχο υψηλής απόδοσης και στις μελέτες κυτταροτοξικότητας ειδικών για υποδοχείς.

Ιστός
Ωοθήκη
Ασθένεια
Ωοθήκη κινέζικου χάμστερ, μη νεοπλασματική· γενετικά τροποποιημένη για επιφανειακή έκφραση του uPAR (PLAUR/CD87)
Εφαρμογές
Διαγνωστικός έλεγχος αντισωμάτων· ανάπτυξη θεραπείας με στόχο τον uPAR· έρευνα σχετικά με την εισβολή και τη μετάσταση του καρκίνου· θεραπεία με ραδιοσυνδεόμενα μόρια· κυτταρομετρία ροής

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Κινέζικο χάμστερ
Σεξ
Γυναίκα
Ιδιότητες ανάπτυξης
Σε επαφή με την επιφάνεια και σε εναιώρημα
Κατάσταση όσον αφορά τους ΓΤΟ
GMO-S1
Λεπτομέρειες σχετικά με την κατάσταση των ΓΤΟ
GMO-S1: This CHO cell line contains a PLAUR/uPAR expression cassette supporting receptor-function analyses. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Επιθηλιοειδής
Τύπος κυττάρου
Επιθηλιακά κύτταρα
Χρόνος διπλασιασμού
περίπου 14-16 ώρες

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
CHO-UPAR (αριθμός καταλόγου Cytion 305978)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
10029
Κελλοσαύρος
CVCL_A8X4

05Έκφραση και ευαισθησία

Επιφανειακά αντιγόνα
uPAR (PLAUR/CD87)
Υποδοχείς που εκφράζονται
TACD2 (TROP2 ή GA733-1)

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο

Για προσκολλημένες καλλιέργειες: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L γλυκόζη, w: 2,5 mM L-γλουταμίνη, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM πυρουβικό νάτριο, w: 1,2 g/L NaHCO3 (αριθμός άρθρου Cytion 820400a)

Για καλλιέργειες εναιωρήματος: CHO Growth Medium A (από την InSCREENeX- αριθμός καταλόγου της InSCREENeX INS-ME-1039)

Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Για προσκολλημένες καλλιέργειες: Συμπληρώστε το μέσο με 5% FBS. Προσθέστε Geneticin (G418-Sulfat) για να επιτευχθεί τελική συγκέντρωση 0,5 mg/ml.
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Για προσκολλημένες καλλιέργειες: Τρυψίνη-EDTA
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Για συνήθη καλλιέργεια προσκολλημένων κυττάρων: Αναρροφήστε το παλιό μέσο καλλιέργειας από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS για να απομακρύνετε τυχόν εναπομείναν μέσο. Αφού αναρροφήσετε το PBS, προσθέστε τον κατάλληλο όγκο διαλύματος Trypsin/EDTA με βάση το μέγεθος του δοχείου καλλιέργειας (π.χ. 1 ml για φιάλη T25, 3 ml για φιάλη T75) και επωάστε σε θερμοκρασία δωματίου ή 37°C για 5-10 λεπτά ή μέχρι να αποκολληθούν τα κύτταρα. Παρακολουθήστε την αποκόλληση στο μικροσκόπιο και χτυπήστε απαλά το δοχείο εάν είναι απαραίτητο για να απελευθερώσετε τα κύτταρα. Αφού αποκολληθούν, προσθέστε πλήρες μέσο για να αδρανοποιήσετε την Τρυψίνη/EDTA, ανασυσσωματώστε απαλά τα κύτταρα και μεταφέρετε μια εκατοστιαία ποσότητα του εναιωρήματος των κυττάρων σε ένα νέο δοχείο καλλιέργειας που περιέχει φρέσκο μέσο. Τοποθετήστε το δοχείο σε επωαστήρα ρυθμισμένο στους 37°C με 5%CO2 και αλλάζετε το μέσο κάθε 2-3 ημέρες.
Αναλογία διαχωρισμού
1 έως 5
Πυκνότητα σποράς
2 έως 5 x 104 κύτταρα/cm2
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Ανάκαμψη μετά την απόψυξη

Μετά την απόψυξη, χωρίστε τα κύτταρα σε αναλογία 1:2 έως 1:3 σε φιάλες Τ25 και αφήστε τα κύτταρα να ανακάμψουν από τη διαδικασία κατάψυξης και να προσκολληθούν (για προσκολλημένες καλλιέργειες) για τουλάχιστον 24 ώρες.

Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Ηλικία δωρητή
Ενηλίκων

Ίσως χρειαστείτε επίσης