HCT116-GFP

HCT116-GFP הוא נגזרת מהונדסת גנטית של קו התאים HCT116 של קרצינומה של המעי הגס האנושי, שהונדסה כך שתבטא באופן קבוע חלבון פלואורסצנטי ירוק (GFP). קו HCT116 ההורי מקורו בסרטן המעי הגס של מטופל בוגר, והוא נמצא בשימוש נרחב כמודל לסרטן המעי הגס עם חוסר בתיקון אי-התאמות (MMR-deficient). ניתוחים ציטוגנטיים הראו שתאי HCT116 מציגים בדרך כלל קריוטיפ כמעט דיפלואידי עם שינויים כרומוזומליים מוגדרים, כולל שינויים מבניים וריאציות במספר העותקים האופייניות לגידולים במעי הגס עם חוסר יציבות במיקרו-סאטליטים. הכנסת גן הדיווח GFP מאפשרת הדמיה בזמן אמת של ההתנהגות התאית מבלי לשנות באופן משמעותי את התכונות הגנטיות והפנוטיפיות הפנימיות של הקו ההורי.

תיוג ה-GFP בתאי HCT116-GFP מושג בדרך כלל באמצעות טרנספקציה יציבה, מה שמביא לפלואורסצנציה אחידה המקלה על הדמיית תאים חיים, מעקב אחר תאים וניתוח כמותי של התרבות, נדידה ודינמיקת צמיחת הגידול. שינוי זה בעל ערך רב במיוחד בבדיקות במבחנה ובמודלים של שתלים זרים in vivo, שבהם ביטוי GFP מאפשר ניטור לא פולשני של התקדמות הגידול, התפשטות גרורתית ותגובה להתערבויות טיפוליות. גישות לפרופיל פנוטיפי מבוסס פלואורסצנציה הוכיחו כי קווי תאים של סרטן המעי הגס, כולל HCT116, מפגינים חתימות תאיות מובחנות הניתנות לזיהוי באמצעות מתודולוגיות מבוססות הדמיה, דבר התומך בשימוש בסמנים פלואורסצנטיים כגון GFP ליישומי סינון בעלי תוכן גבוה.

HCT116-GFP משמש ככלי אמין לחקר הביולוגיה של סרטן המעי הגס, ומאפשר ניתוח מפורט של התנהגות תאי הגידול, אינטראקציות מיקרו-סביבתיות ויעילות טיפולית הן במחקר בסיסי והן במחקר תרגומי.

שינוי גנטי: עבר שינוי יציב באמצעות העברה לנטרווירוס שאינו מסוגל לשכפל את עצמו, כדי לבטא את הרפורט של החלבון הזוהר הירוק ZsGreen1; נשמר כאוכלוסייה פוליקלונלית תחת סלקציה של פורומיצין (1–5 µg/mL). רמת אבטחה S1/BSL-1.

37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.

לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו