HCT116-GFP

HCT116-GFP är en genetiskt modifierad variant av den humana kolorektala karcinomcellinjen HCT116, som har modifierats för att konstant uttrycka grönt fluorescerande protein (GFP). Den ursprungliga HCT116-linjen härstammar från ett kolonkarcinom hos en vuxen patient och används i stor utsträckning som modell för kolorektalcancer med bristande mismatch-reparation (MMR-brist). Cytogenetiska analyser har visat att HCT116-celler vanligtvis uppvisar en nästan diploid karyotyp med definierade kromosomförändringar, inklusive strukturella omarrangemang och variationer i kopiantal som är karakteristiska för kolorektala tumörer med mikrosatellitinstabilitet. Införandet av GFP-reportergenen möjliggör visualisering i realtid av cellernas beteende utan att den ursprungliga cellinjen förändras väsentligt vad gäller sina inneboende genetiska och fenotypiska egenskaper.

GFP-märkningen i HCT116-GFP-celler uppnås vanligtvis genom stabil transfektion, vilket resulterar i en enhetlig fluorescens som underlättar avbildning av levande celler, cellspårning och kvantitativ analys av proliferation, migration och tumörtillväxtdynamik. Denna modifiering är särskilt värdefull i in vitro-analyser och in vivo-xenotransplantatmodeller, där GFP-uttryck möjliggör icke-invasiv övervakning av tumörprogression, metastatisk spridning och respons på terapeutiska ingrepp. Fluorescensbaserade metoder för fenotypisk profilering har visat att koloncancercellinjer, inklusive HCT116, uppvisar distinkta intracellulära signaturer som kan avläses med hjälp av avbildningsbaserade metoder, vilket stödjer användbarheten av fluorescerande markörer såsom GFP för höginnehållsscreening.

HCT116-GFP fungerar som ett robust verktyg för att undersöka kolorektal cancerbiologi och möjliggör detaljerad analys av tumörcellers beteende, interaktioner i mikromiljön och terapeutisk effekt inom såväl grundforskning som translationell forskning.

Genetisk modifiering: Stabilt modifierad genom replikationsinkompetent lentiviral transduktion för att uttrycka det gröna fluorescerande proteinet ZsGreen1; hålls som en polyklonal population under puromycinselektion (1–5 µg/mL). S1/BSL-1-säkerhetsklass.

37°C, 5%_CO2, befuktad atmosfär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet

För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring