
- Tissue
- 结肠
- Disease
- 结肠癌
- Synonyms
- HCT-116, HCT.116, HCT_116, HCT116, HCT116wt, HCT-116/P, HCT-116/parental, CoCL2
Documents
HCT116-GFP
Cell line · Product number 305649
HCT116-GFP is a genetically modified derivative of the human colorectal carcinoma cell line HCT116, engineered to constitutively express green fluorescent...
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01General information
- Description
HCT116-GFP 是人类结直肠癌细胞系 HCT116 的基因改造衍生物,经过工程改造后可持续表达绿色荧光蛋白(GFP)。 亲本 HCT116 细胞系源自一名成年患者的结肠癌,被广泛用作错配修复缺陷(MMR 缺陷)结直肠癌的模型。 细胞遗传学分析表明,HCT116 细胞通常表现出近二倍体的核型,具有明确的染色体改变,包括微卫星不稳定性阳性结直肠肿瘤特有的结构重排和拷贝数变异。 引入 GFP 报告基因后,可以在不显著改变亲本细胞系固有遗传和表型特性的情况下,实时观察细胞行为。
HCT116-GFP 细胞中的 GFP 标记通常通过稳定转染实现,从而产生均匀的荧光,便于活细胞成像、细胞追踪以及对增殖、迁移和肿瘤生长动态的定量分析。 这种改造在体外实验和体内异种移植模型中尤为宝贵,在这些模型中,GFP的表达允许对肿瘤进展、转移扩散以及对治疗干预的反应进行无创监测。 基于荧光的表型分析方法已证明,包括 HCT116 在内的结肠癌细胞系表现出独特的细胞内特征,这些特征可通过成像方法捕捉,这印证了 GFP 等荧光报告基因在高通量筛选应用中的实用性。
HCT116-GFP是研究结直肠癌生物学的一款可靠工具,可在基础和转化研究背景下,对肿瘤细胞行为、微环境相互作用以及治疗疗效进行详细分析。
基因修饰:通过复制缺陷型慢病毒转导进行稳定修饰,以表达 ZsGreen1 绿色荧光蛋白报告基因;在嘌呤霉素(1–5 µg/mL)筛选下维持为多克隆细胞群。S1/BSL-1 生物安全等级。
- Tissue
- 结肠
- Disease
- 结肠癌
- Synonyms
- HCT-116
- HCT.116
- HCT_116
- HCT116
- HCT116wt
- HCT-116/P
- HCT-116/parental
- CoCL2
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This cell line contains a stably integrated ZsGreen1 green fluorescent protein reporter introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Doubling time
- 27 小时;17.1 小时;22 小时;25.02 小时;36 小时;18.14 ± 0.051 小时;约 25-48 小时;17.4 小时;约 21 小时
04Identifiers
- Citation
- HCT116-GFP(Cytion 产品编号 305649)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0291
05Expression and susceptibility
- Antigen expression
- ZsGreen1(绿色荧光蛋白)
- Mutational profile
- 突变:p.Lys437Argfs*5,纯合子;突变:p.Ile2675Aspfs*6,杂合子;突变:p.Arg24Serfs*20,杂合子;突变:p.Glu33Argfs*20,杂合子; 突变:p.Asp74fs*21,杂合子;突变:p.Ser45del,杂合子;突变:p.Met1470Cysfs*22,杂合子;突变:p.Asn1700Thrfs*9,杂合子;突变:p.Gly13Asp,杂合子; 突变:p.His1047Arg,杂合子;突变:p.Leu450Ter,杂合子;突变:p.Lys128Serfs*35,纯合子
06Handling and culture
- Culture medium
- McCoys 5a,w:3.0 克/升葡萄糖,w:稳定谷氨酰胺,w:2.0 毫摩尔丙酮酸钠,w:2.2 克/升 NaHCO3(Cytion 文章编号 820200a)。
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, 加湿环境。
- Supplements
- 在培养基中添加 10% FBS
- Dissociation reagent
- Accutase
- Seeding density
- 2至4×10⁴个细胞/平方厘米
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Quality control and cryopreservation
- Freeze medium
- 作为冷冻保存培养基,我们使用完全生长培养基+10% DMSO,以获得足够的解冻后存活率。
- Storage conditions
如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。
- Shipping conditions
冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
08Donor
- Donor age
- 48 年
- Ethnicity
- 高加索人
09Legal and safety
- Safety precautions
- 计划将低温样品储存在液氮中以便将来解冻时,必须遵守严格的安全措施。在将冷冻样本移入或移出液氮罐时,必须穿戴适当的防护手套和防护服,并使用面罩或安全护目镜。这样做是为了降低在移出时因冷冻样品爆炸而造成伤害的风险,因为爆炸可能导致锋利的碎片飞溅。
- Warranty
在Cytion,我们保证产品的质量和活力。 我们保证,从我们的工厂发货后 60 天内,我们的细胞在开始培养时都是存活的。 我们保证所有材料均符合分析证书和/或产品说明书中描述的规格。
有关详细信息,请参阅我们的 <a href="" /Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">保修声明 。
- Material Transfer Agreement required
- Yes