Skip to content
HCT116-GFP
Tissue
Đại tràng
Disease
Ung thư đại tràng
Synonyms
HCT-116, HCT.116, HCT_116, HCT116, HCT116wt, HCT-116/P, HCT-116/parental, CoCL2

Documents

HCT116-GFP

Cell line · Product number 305649

HCT116-GFP is a genetically modified derivative of the human colorectal carcinoma cell line HCT116, engineered to constitutively express green fluorescent...

€800.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

HCT116-GFP là một dòng tế bào biến đổi gen có nguồn gốc từ dòng tế bào ung thư đại trực tràng ở người HCT116, được thiết kế để biểu hiện liên tục protein huỳnh quang xanh (GFP). Dòng tế bào HCT116 gốc có nguồn gốc từ một khối u ung thư đại tràng của một bệnh nhân người lớn và được sử dụng rộng rãi làm mô hình cho ung thư đại trực tràng thiếu hụt sửa chữa không khớp (MMR-deficient). Các phân tích tế bào di truyền đã chỉ ra rằng các tế bào HCT116 thường có kiểu nhiễm sắc thể gần như lưỡng bội với các biến đổi nhiễm sắc thể xác định, bao gồm các sắp xếp lại cấu trúc và biến đổi số lượng bản sao đặc trưng của các khối u đại tràng dương tính với bất ổn định microsatellite. Việc đưa gen báo cáo GFP vào cho phép quan sát hành vi tế bào theo thời gian thực mà không làm thay đổi đáng kể các đặc tính di truyền và hình thái vốn có của dòng tế bào gốc.

Việc đánh dấu GFP trong các tế bào HCT116-GFP thường được thực hiện thông qua quá trình chuyển gen ổn định, dẫn đến sự phát quang đồng nhất, tạo điều kiện thuận lợi cho việc chụp ảnh tế bào sống, theo dõi tế bào và phân tích định lượng về sự tăng sinh, di chuyển và động lực phát triển của khối u. Sự biến đổi này đặc biệt có giá trị trong các thử nghiệm in vitro và các mô hình cấy ghép xenograft in vivo, nơi biểu hiện GFP cho phép theo dõi không xâm lấn sự tiến triển của khối u, sự lan rộng di căn và phản ứng với các can thiệp điều trị. Các phương pháp phân tích đặc điểm hình thái dựa trên huỳnh quang đã chứng minh rằng các dòng tế bào ung thư đại tràng, bao gồm HCT116, thể hiện các dấu ấn nội bào đặc trưng có thể được ghi nhận thông qua các phương pháp dựa trên hình ảnh, từ đó khẳng định tính hữu ích của các chất báo hiệu huỳnh quang như GFP trong các ứng dụng sàng lọc nội dung cao.

HCT116-GFP đóng vai trò là công cụ mạnh mẽ để nghiên cứu sinh học ung thư đại trực tràng, cho phép phân tích chi tiết hành vi của tế bào khối u, các tương tác trong môi trường vi mô và hiệu quả điều trị trong cả bối cảnh nghiên cứu cơ bản và nghiên cứu chuyển giao.

Sửa đổi gen: Được sửa đổi ổn định bằng cách truyền lentivirus không có khả năng nhân lên để biểu hiện chất báo hiệu protein huỳnh quang xanh ZsGreen1; được duy trì dưới dạng quần thể đa dòng dưới sự chọn lọc puromycin (1–5 µg/mL). Mức độ an toàn S1/BSL-1.

Tissue
Đại tràng
Disease
Ung thư đại tràng
Synonyms
  • HCT-116
  • HCT.116
  • HCT_116
  • HCT116
  • HCT116wt
  • HCT-116/P
  • HCT-116/parental
  • CoCL2

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated ZsGreen1 green fluorescent protein reporter introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Doubling time
27 giờ; 17,1 giờ; 22 giờ; 25,02 giờ; 36 giờ; 18,14 ± 0,051 giờ; ~25–48 giờ; 17,4 giờ; ~21 giờ

04Identifiers

Citation
HCT116-GFP (Mã sản phẩm Cytion: 305649)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0291

05Expression and susceptibility

Antigen expression
ZsGreen1 (protein huỳnh quang màu xanh lá cây)
Mutational profile
Đột biến: p.Lys437Argfs*5, đồng hợp tử; Đột biến: p.Ile2675Aspfs*6, dị hợp tử; Đột biến: p.Arg24Serfs*20, dị hợp tử; Đột biến: p.Glu33Argfs*20, dị hợp tử; Biến đổi gen: p.Asp74fs*21, dị hợp tử; Biến đổi gen: p.Ser45del, dị hợp tử; Biến đổi gen: p.Met1470Cysfs*22, dị hợp tử; Biến đổi gen: p.Asn1700Thrfs*9, dị hợp tử; Biến đổi gen: p.Gly13Asp, dị hợp tử; Đột biến: p.His1047Arg, dị hợp tử; Đột biến: p.Leu450Ter, dị hợp tử; Đột biến: p.Lys128Serfs*35, đồng hợp tử

06Handling and culture

Culture medium
McCoys 5a, chứa: 3,0 g/L glucose, chứa: glutamine ổn định, chứa: 2,0 mM natri pyruvate, chứa: 2,2 g/L NaHCO₃ (Số hiệu sản phẩm Cytion 820200a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung 10% huyết thanh bò phôi (FBS) vào môi trường nuôi cấy
Dissociation reagent
Accutase
Seeding density
2 đến 4 × 10⁴ tế bào/cm²
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Quality control and cryopreservation

Freeze medium
Với tư cách là môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sót sau khi rã đông.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

08Donor

Donor age
48 năm
Ethnicity
Người da trắng