HCT116-GFP

HCT116-GFP ir ģenētiski modificēts cilvēka kolorektālās karcinomas šūnu līnijas HCT116 atvasinājums, kas izveidots tā, lai pastāvīgi ekspresētu zaļo fluorescējošo proteīnu (GFP). Sākotnējā HCT116 līnija ir iegūta no pieauguša pacienta resnās zarnas karcinomas un tiek plaši izmantota kā modelis kolorektālajam vēzim ar nesakritības reparācijas deficītu (MMR deficītu). Citogenētiskās analīzes liecina, ka HCT116 šūnām parasti ir gandrīz diploīds kariotips ar noteiktām hromosomu izmaiņām, tostarp strukturālām pārkārtošanām un kopiju skaita variācijām, kas raksturīgas kolorektālajiem audzējiem ar pozitīvu mikrosatelītu nestabilitāti. GFP reportergēna ievadīšana ļauj reāllaikā vizualizēt šūnu uzvedību, būtiski nemainot vecāklīnijas iekšējās ģenētiskās un fenotipiskās īpašības.

GFP marķēšanu HCT116-GFP šūnās parasti panāk ar stabilas transfekcijas palīdzību, kā rezultātā rodas vienmērīga fluorescences izstarošana, kas atvieglo dzīvo šūnu attēlveidošanu, šūnu izsekošanu un proliferācijas, migrācijas un audzēja augšanas dinamikas kvantitatīvo analīzi. Šī modifikācija ir īpaši vērtīga in vitro testos un in vivo ksenotransplantātu modeļos, kur GFP ekspresija ļauj neinvazīvi uzraudzīt audzēja progresēšanu, metastāžu izplatīšanos un reakciju uz terapeitiskām intervencēm. Uz fluorescenci balstītas fenotipiskās profilēšanas metodes ir parādījušas, ka resnās zarnas vēža šūnu līnijas, tostarp HCT116, izrāda atšķirīgas intracelulāras pazīmes, kuras var fiksēt, izmantojot attēlveidošanas metodes, tādējādi apliecinot tādu fluorescējošo marķieru kā GFP lietderību augstas izšķirtspējas skrīninga lietojumos.

HCT116-GFP kalpo kā uzticams instruments kolorektālā vēža bioloģijas izpētei, ļaujot veikt detalizētu audzēja šūnu uzvedības, mikroapstākļu mijiedarbības un terapeitiskās efektivitātes analīzi gan fundamentālajos, gan translacionālajos pētījumos.

Ģenētiskā modifikācija: stabili modificēta ar replikācijas nespējīgu lentivīrusa transdukciju, lai ekspresētu zaļo fluorescējošo proteīnu marķieri ZsGreen1; tiek uzturēta kā poliklonāla populācija puromicīna selekcijas apstākļos (1–5 µg/ml). S1/BSL-1 drošības līmenis.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu