HCT116-GFP

HCT116-GFP هو مشتق معدل وراثيًا من سلالة الخلايا السرطانية القولونية المستقيمية البشرية HCT116، وقد تم هندسته ليُعبِّر بشكل دائم عن البروتين الفلوري الأخضر (GFP). ينشأ السلالة الأم HCT116 من سرطان القولون لمريض بالغ، ويُستخدم على نطاق واسع كنموذج لسرطان القولون والمستقيم الذي يعاني من نقص إصلاح عدم التطابق (MMR-deficient). أظهرت التحليلات الخلوية الوراثية أن خلايا HCT116 تُظهر عادةً نمطًا كروموسوميًا شبه ثنائي الصيغة الصبغية مع تغيرات كروموسومية محددة، بما في ذلك إعادة الترتيب الهيكلي وتغيرات عدد النسخ التي تتميز بها أورام القولون والمستقيم الإيجابية لعدم الاستقرار الميكروساتليتي. يتيح إدخال جين GFP المبلغ تصور السلوك الخلوي في الوقت الفعلي دون إحداث تغيير جوهري في الخصائص الجينية والظاهرية الجوهرية للسلالة الأصلية.

يتم تحقيق وسم GFP في خلايا HCT116-GFP عادةً من خلال التحويل الجيني المستقر، مما ينتج عنه فلورة موحدة تسهل تصوير الخلايا الحية، وتتبع الخلايا، والتحليل الكمي للتكاثر والهجرة وديناميكيات نمو الورم. يُعد هذا التعديل ذا قيمة خاصة في الاختبارات المختبرية ونماذج الزرع بين الأنواع الحية، حيث يتيح التعبير عن GFP المراقبة غير الغازية لتطور الورم، وانتشار النقائل، والاستجابة للتدخلات العلاجية. وقد أظهرت مناهج تحديد السمات الظاهرية القائمة على الفلورة أن سلالات خلايا سرطان القولون، بما في ذلك HCT116، تُظهر سمات داخل الخلية مميزة يمكن التقاطها من خلال منهجيات قائمة على التصوير، مما يدعم فائدة المُبلغات الفلورية مثل GFP في تطبيقات الفرز عالي المحتوى.

يُعد HCT116-GFP أداة قوية لدراسة بيولوجيا سرطان القولون والمستقيم، حيث يتيح التحليل التفصيلي لسلوك الخلايا السرطانية، والتفاعلات مع البيئة المحيطة، والفعالية العلاجية في سياقات البحث الأساسي والتطبيقي على حد سواء.

التعديل الجيني: تم تعديلها بشكل مستقر عن طريق نقل فيروسي لينتيفي غير قادر على التكاثر للتعبير عن مؤشر البروتين الفلوري الأخضر ZsGreen1؛ ويتم الحفاظ عليها كمجموعة متعددة النسائل تحت انتقاء البوروميسين (1–5 ميكروغرام/مل). احتواء S1/BSL-1.

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان